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| 人野生型P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体的构建及其在Mc3细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 饶国洲,李晓红,李昂,郅克谦,张引成. 人野生型P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体的构建及其在Mc3细胞中的表达[J]. 现代检验医学杂志, 2008, 23(6) |
| 作者姓名： | 饶国洲 李晓红 李昂 郅克谦 张引成 |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学口腔医院,中心实验室,西安,710004 2. 西安交通大学口腔医院,修复科,西安,710004 3. 西安交通大学口腔医院,颌面外科,西安,710004 |
| 摘 要： | 目的构建P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体，并探讨其在人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞中的表达。方法应用分子克隆技术，将mdm2 cDNA序列反向插入到含有P^53基因序列pDOR—Neo中的P^53。基因序列下游，构成含有P^53基因与反义mdm2基因融合基因的逆转录病毒表达载体。经酶切分析鉴定后命名为pDOR—Neo—P^53-F mdm2并将重组载体通过脂质体转染Mc3细胞，通过G418筛选转染阳性细胞，并采用Westernblot方法检测P^53蛋白表达。结果酶切鉴定证实重组载体含有P^53与反义mdm2 cDNA片段，实验结果表明：转染后P^53蛋白（1．35±0．14）较对照组P^53蛋白（6．26±0．11）含量显著减低（P〈0．01），转染空载体P^53蛋白（6．24土0．12）与对照组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论P^53与反义mdm2基因融合体真核表达载体构建成功，并表达野生型P^53蛋白和封闭mdm2基因，为今后进一步研究打下了基础。 |
| 关 键 词： | 分子克隆 基因表达 Mc3细胞 免疫印迹法 P^53基因 mdm2基因 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human Wild-type p53 Gene and Antisense mdm2 Fusion and Its Expression in Mc3 Cell |
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| RAO Guo-zhou,LI Xiao-hong,LI Ang,ZHI Ke-qian,ZHANG Yin-cheng. Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human Wild-type p53 Gene and Antisense mdm2 Fusion and Its Expression in Mc3 Cell[J]. Journal of Modern Laboratory Medicine, 2008, 23(6) | |
| Authors: | RAO Guo-zhou LI Xiao-hong LI Ang ZHI Ke-qian ZHANG Yin-cheng |
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