| 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1高表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 何玲,韩钰,刘梦瑶,蔡富强,王艳林. 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1高表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响[J]. 肿瘤, 2011, 31(3): 185-191. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.03.001 |
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| 作者姓名： | 何玲 韩钰 刘梦瑶 蔡富强 王艳林 |
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| 作者单位： | 三峡大学分子生物学研究所,宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)高表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。方法:采用巢氏PCR法从小鼠肝癌H22细胞cDNA中克隆出小鼠OAZI-1基因,并构建重组质粒pcDNA3.1(+)/OAZI-1。采用脂质体转染法将重组质粒转染入B16-F1细胞后,Western印迹法和实时荧光定量PCR法鉴定高表达OAZI-1的B16-F1细胞株。MTT法和FCM检测OAZI-1高表达对B16-F1细胞增殖和细胞周期的影响。反相高效液相色谱检测OAZI-1高表达对细胞内多胺水平的影响。化学发光法检测细胞内精胺氧化酶(spermine oxidase,SMO)的活性。结果:成功获得高表达OAZI-1的B16-F1细胞克隆株B16/over,该细胞中OAZI-1在mRNA水平的表达量是转染空载体质粒对照组细胞B16/3.1的3.6倍。B16/over细胞中,鸟氨酸脱羧酶抗酶(ornithine decarboxylase antizyme,OAZ)的mRNA表达水平降低,鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)的mRNA表达水平升高。高表达OAZI-1能促进B16-F1细胞增殖,并影响细胞周期,G0/G1期细胞减少而S期和G2/M期细胞增加。B16/over细胞中腐胺的含量明显增加,精脒和精胺的含量减少,而且SMO活性升高。结论:OAZI-1高表达可能通过增加细胞内腐胺含量,促进黑素瘤细胞增殖,提示该抑制蛋白可能成为黑素瘤治疗的一个潜在靶点。
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| 关 键 词： | 黑素瘤,实验性 生物源多胺类 鸟氨酸脱羧酶 抑制蛋白类 细胞增殖 |
Effect of ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1 overexpression on the proliferation of B16-F1 mouse melanoma cells |
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| HE Ling,HAN Yu,LIU Meng-yao,CAI Fu-qiang,WANG Yan-lin. Effect of ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1 overexpression on the proliferation of B16-F1 mouse melanoma cells[J]. Tumor, 2011, 31(3): 185-191. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.03.001 |
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| Authors: | HE Ling HAN Yu LIU Meng-yao CAI Fu-qiang WANG Yan-lin |
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| Affiliation: | Institute of Molecular Biology,China Three Gorges University,Yichang 443002,China |
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