| 哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞长期培养体系的建立及临床意义 |
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| 引用本文： | 刘俊,赵荣祥. 哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞长期培养体系的建立及临床意义[J]. 浙江医学, 2011, 33(2): 153-156,189 |
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| 作者姓名： | 刘俊 赵荣祥 |
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| 作者单位： | 浙江省中医院耳鼻喉科,杭州,310006 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年基金，浙江省卫生厅基金资助，浙江省中医药管理局基金资助 |
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| 摘 要： | 目的建立哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞（CSEC）长期培养体系，为内耳毛细胞再生、分子及基因研究提供细胞来源。方法取1d龄wistar大鼠耳蜗感觉上皮作组织块培养，有限稀释法纯化并得到CSEC单克隆细胞系。胰蛋白酶＋胶原酶消化培养传代，传25代。取第25代CSEC，在倒置显微镜、透射电镜下对CSEC的生长特征、形态结构进行观察；免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白，鉴定CSEC细胞来源。免疫荧光细胞化学、RT—PCR检测毛细胞标志物Brn．3a、Calretinin及AchRa9、MyosinVllamRNA的表达，鉴定CSEC特征。结果第25代CSEC均呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态，细胞之间连接紧密，单层时呈“铺路石样”外观，可见“dome”结构；其可表达细胞角蛋白和不表达波形蛋白，微绒毛丰富，细胞间连接紧密，提示其为上皮细胞来源：并可表达毛细胞特征性标志物Brn3．a、Calretinin及AchRa9、Myosin Vlla mRNA。结论本实验成功建立了哺乳动物CSEC长期培养体系。长期培养的CSEC性状未发生明显改变，具有毛细胞前体细胞的特征。这为毛细胞再生的机制及内耳分子、基因研究提供了稳定的细胞来源。
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| 关 键 词： | 耳蜗 感觉上皮 长期培养 毛细胞 |
Establishment of long-term culture system of mammalian cochlear sensory epithelial cells |
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| LIU Jun,ZHAO Rongxiang. Establishment of long-term culture system of mammalian cochlear sensory epithelial cells[J]. Zhejiang Medical Journal, 2011, 33(2): 153-156,189 |
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| Authors: | LIU Jun ZHAO Rongxiang |
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| Affiliation: | . Department of Otolaryngology, Zhejiang Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310006, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cochlear Sensory epithelial Long-term culture Hair cells |
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