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锰超氧化物歧化酶过表达对食管癌TE-1细胞增殖及移植瘤生长的双向影响
引用本文:孙国贵,王雅棣,郑明民,于秀荣,景绍武,程云杰,刘青. 锰超氧化物歧化酶过表达对食管癌TE-1细胞增殖及移植瘤生长的双向影响[J]. 肿瘤, 2011, 31(2): 99-105. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.02.002
作者姓名:孙国贵  王雅棣  郑明民  于秀荣  景绍武  程云杰  刘青
作者单位:1. 河北医科大学第四医院放疗科,石家庄,050011
2. 北京军区总医院放疗科,北京,100700
基金项目:1.国家自然科学基金资助项目(编号:30540005) 2.国家人事部高层次留学人才回国资助项目[编号:国人厅发(2005)118号] 3.教育部留学归国人员科研启动基金资助项目
摘    要:目的:通过体内外实验探讨锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)过量表达对食管癌TE-1细胞增殖的影响。方法:采用病毒感染法将不同剂量构建有MnSOD基因的重组质粒转入食管癌TE-1细胞,建立中、高表达MnSOD的TE-1细胞pLenti6-mMnSOD/TE-1(TE-1Mm)和pLenti6-hMnSOD/TE-1(TE-1Mh);采用RT-PCR法及Western印迹法检测转染MnSOD重组质粒的TE-1细胞中mRNA和蛋白水平的表达变化情况;应用平皿克隆形成实验及FCM法观察细胞增殖、凋亡和周期变化的情况;将MnSOD转染后的TE-1细胞接种到裸鼠皮下检测成瘤及肿瘤生长情况,采用免疫组织化学和Western印迹法检测移植瘤中MnSOD蛋白的表达水平。结果:建立稳定表达MnSOD蛋白的TE-1细胞株;RT-PCR及Western印迹法检测结果均证实,感染不同剂量的MnSOD重组质粒的TE-1细胞中,MnSOD的表达水平随感染剂量的增加而上升;细胞平皿克隆检测结果提示,TE-1Mm和TE-1Mh细胞的集落形成能力为(23.0±2.7)%和(45.3±4.5)%,分别低于和高于TE-1细胞的(34.7±4.2)%及TE-1n细胞的(33.7±4.7)%,实验组间比较及与对照组进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05);AnnexinV-PI双染FCM检测结果显示,TE-1Mm和TE-1Mh细胞的早期细胞凋亡率为(10.6±1.0)%和(1.0±0.1)%,分别高于和低于对照组TE-1细胞的(2.6±0.2)%和TE-1n细胞的(2.5±0.3)%(P<0.05);细胞周期检测结果显示,MnSOD过量表达使G0/G1期细胞数在TE-1Mm细胞中增多,而在TE-1Mh细胞中减少,G2/M期和S期细胞数则在TE-1Mm细胞中减少,在TE-1Mh细胞中增多;与亲本TE-1细胞和感染空载体TE-1n细胞相比,TE-1Mm细胞处在增殖期细胞少,而TE-1Mh细胞处在增殖期细胞多(P<0.05)。TE-1Mm细胞接种裸鼠后,肿瘤生长慢,体积小,而接种TE-1Mh细胞则相反,肿瘤生长速度明显加快;瘤组织中的MnSOD蛋白的表达水平,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MnSOD过量表达通过改变细胞周期和凋亡,对食管癌TE-1细胞的增殖和移植瘤的生长均表现为促进和抑制增殖的双向作用。

关 键 词:食管肿瘤  转染  细胞增殖  细胞凋亡  锰超氧化物歧化酶

A two-way effect of MnSOD overexpression on proliferation of esophageal cancer cell line TE-1 and xengograft tumor growth
SUN Guo-gui,WANG Ya-di,ZHENG Ming-min,YU Xiu-rong,JING Shao-wu,CHENG Yun-jie,LIU Qing. A two-way effect of MnSOD overexpression on proliferation of esophageal cancer cell line TE-1 and xengograft tumor growth[J]. Tumor, 2011, 31(2): 99-105. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.02.002
Authors:SUN Guo-gui  WANG Ya-di  ZHENG Ming-min  YU Xiu-rong  JING Shao-wu  CHENG Yun-jie  LIU Qing
Affiliation:SUN Guo-gui1,WANG Ya-di1,ZHENG Ming-min2,YU Xiu-rong1,JING Shao-wu1,CHENG Yun-jie1,LIU Qing1 1.Department of Radiotherapy,Fourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China,2.Department of Radiotherapy,General Hospital of Beijing Military Area,Beijing 100700
Abstract:Objective:To explore the effect of manganese superoxide dismutase(MnSOD) overexpression on the proliferation of esophageal cancer cell line TE-1 in vivo and in vitro.Methods:TE-1 cells were transfected with a plasmid binding MnSOD cDNA,and then TE-1Mm cells(with moderate expression of MnSOD) and TE-1Mh cells(with high expression of MnSOD) were established.RT-PCR and Western blotting were used to detect the mRNA and protein expressions of target MnSOD gene in both of TE-1Mm and TE-1Mh cells,respectively.The ...
Keywords:Esophageal neoplasms  Transfection  Cell proliferation  Apoptosis  Manganese superoxide dismutase  
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