| SARS冠状病毒S1蛋白的原核表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 尹卫国 吴移谋 谭立志 肖建华 杨秋林 张文波 曾桥 万艳平. SARS冠状病毒S1蛋白的原核表达与鉴定[J]. 中国人兽共患病杂志, 2005, 21(3): 218-220,224 |
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| 作者姓名： | 尹卫国 吴移谋 谭立志 肖建华 杨秋林 张文波 曾桥 万艳平 |
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| 作者单位： | 湖南省南华大学病原生物学研究所,衡阳421001 |
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| 基金项目： | 湖南省教育厅“非典型肺炎”科技攻关重点基金资助项目 (No .2 0 0 3 99) |
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| 摘 要： | 目的 克隆SARS冠状病毒(SARs-CoV)S1基因片段，构建原核表达载体，并在宿主菌中诱导表达带组氨酸标记的融合蛋白。方法人工合成SARS-CoV Sl基因片段，克隆至pUCm-T载体，经DNA序列分析和酶切后，将酶切片段亚克隆至原核表达载体pET-28b( )，重组子pET-28b／SARS-S1转化大肠杆菌ril，IPTG诱导表达，Western blot鉴定表达产物；纯化表达产物并用ELISA检测其抗原特异性。结果 获得了主要以包涵体形式存在的32kD的目的蛋白，Western blot鉴定其为带组氨酸标记的融合蛋白，ELISA证明其能与合成肽的抗体及病人血清中的SARS-CoV的抗体特异结合。结论 成功构建了SARS-CoV S1基因的组氨酸标记表达载体pET-28b／SARS-S1，并在ril中得到了高效表达；表达的s1蛋白具有较好的抗原特异性，便于免疫动物以获得特异抗体，为SARS-CoV的实验室快速诊断打下了基础。
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| 关 键 词： | SARS冠状病毒S1蛋白 原核表达 鉴定 |
| 文章编号： | 1002-2694(2005)03-0218-03 |
Expression and identification of SARS coronavirus S1 protein in prokaryotic cell |
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| YIN Wei-guo,WU Yi-mou,TAN Li-zhi,XIAO Jian-hua,YANG Qiu-lin,ZHANG Wen-bo,ZENG Qiao,WAN Yan-ping. Expression and identification of SARS coronavirus S1 protein in prokaryotic cell[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2005, 21(3): 218-220,224 |
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| Authors: | YIN Wei-guo WU Yi-mou TAN Li-zhi XIAO Jian-hua YANG Qiu-lin ZHANG Wen-bo ZENG Qiao WAN Yan-ping |
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| Keywords: | SARS coronavirus(SARS-CoV) S1 protein expression identification |
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