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重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:韩世伟,张阳德,万小平,陈玉祥. 重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(20). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.20.015
作者姓名:韩世伟  张阳德  万小平  陈玉祥
作者单位:1. 中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,410008
2. 中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市410008;中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室,湖南省长沙市,410008
3. 中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室,湖南省长沙市,410008
基金项目:国家科技部"十五"863计划项目,课题名称:Hsp70、GM-CSF双修饰DU145、PC3激素非依赖性前列腺细胞株全细胞疫苗的研制,中南大学研究生学位论文创新基金;课题名称:Hsp70、GM-CSF双修饰DU145、PC3激素非依赖性前列腺细胞株全细胞疫苗的研制 
摘    要:背景:热休克蛋白70的肿瘤免疫作用近年来受到国内外学者的广泛关注,然而目前常用的诱导内源性热休克蛋白70表达的方法,如热应激、缺血预处理等均存在一些弊端.目的:拟构建携带并正确表达外源性人热休克蛋白70基因的重组真核表达载体.方法:外源性热休克蛋白70基因连接入真核表达载体pDC315-EGFP中,转化大肠杆菌感受态细胞,重组真核表达载体外源基因测序及PCR检测鉴定阳性克隆后转染人胚肾293细胞,荧光显微镜及western blot鉴定外源基因在细胞中的表达.结果与结论;经PCR和测序证实外源性人热休克蛋白70基因正确重组入真核表达载体pDC315-EGFP,转染293细胞后荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP的表达,Western blot检测到热休克蛋白70在293细胞中有效表达.

关 键 词:热休克蛋白70  真核表达载体  基因载体  基因重组  基因治疗

Construction and identification of a recombinant eukaryotic expression vector containing human heat shock protein 70 gene
Han Shi-wei,Zhang Yang-de,Wan Xiao-ping,Chen Yu-xiang. Construction and identification of a recombinant eukaryotic expression vector containing human heat shock protein 70 gene[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(20). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.20.015
Authors:Han Shi-wei  Zhang Yang-de  Wan Xiao-ping  Chen Yu-xiang
Abstract:
Keywords:
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