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小干扰RNA沉默NF-κB P65基因表达对胰腺癌细胞株PANC-1增殖与凋亡的影响
引用本文:王殿忠,谢 敏,潘一明,朱海涛.小干扰RNA沉默NF-κB P65基因表达对胰腺癌细胞株PANC-1增殖与凋亡的影响[J].南京医科大学学报,2008,28(2):184-189.
作者姓名:王殿忠  谢 敏  潘一明  朱海涛
作者单位:南京医科大学鼓楼临床医学院普通外科,江苏南京210008
基金项目:江苏省南京市医学科技发展基金
摘    要:目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC-1中NF-κB P65基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法:利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人NF-κB P65的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC-1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内NF-κB P65mRNA与细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA的表达.ELISA法检测NF-κB亚单位P65的DNA结合活性的改变.MTT法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率及细胞周期的变化.结果:化学合成的人NF-κB P65 siRNA能有效地抑制PANC-1细胞中NF-κB P65与cyclinD1基因在mRNA水平上的表达(P<0.01),同时ELISA结果显示,RelA siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).RelA siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.01),同时G1期细胞所占的比例较对照组增加了10%,S期和G2/M期细胞则分别减少了4%与6%.结论:体外实验初步证明NF-κB P65基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色,通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC-1增殖并诱导其凋亡.

关 键 词:RNA干扰  NF-κB  PANC-1细胞  细胞凋亡
文章编号:1007-4368(2008)02-0184-06
收稿时间:2007-06-16
修稿时间:2007年6月16日

Proliferative and apoptotic effects of siRNA-mediated NF-κB P65 gene silencing pancreatic carcinoma cell strain PANC-1
WANG Dian-zhong,XIE Min,PAN Yi-ming and ZHU Hai-tao.Proliferative and apoptotic effects of siRNA-mediated NF-κB P65 gene silencing pancreatic carcinoma cell strain PANC-1[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2008,28(2):184-189.
Authors:WANG Dian-zhong  XIE Min  PAN Yi-ming and ZHU Hai-tao
Institution:Department of General Surgery,the Drum Tower Hospital Affiliated to Nanjing University,Nanjing 210008,China
Abstract:
Keywords:
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