丹酚酸B在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程对心肌早期基因mRNA表达的影响 |
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引用本文: | 华声瑜,赵桂峰,郭茂娟,范英昌.丹酚酸B在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程对心肌早期基因mRNA表达的影响[J].中国老年学杂志,2009,29(4). |
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作者姓名: | 华声瑜 赵桂峰 郭茂娟 范英昌 |
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作者单位: | 1. 天津中医药大学基础医学部,天津,300193 2. 天津中医药大学第一附属医院心内科 |
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基金项目: | 天津市社会发展科技计划 |
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摘 要: | 目的 探讨丹参单体丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠 MSCs 体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点.方法 选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯 MSCs,并进行培养扩增.免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定.分别应用10 μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)及250 mg/L SalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24 h,于诱导后第4周,用实时荧光定量RT-PCR法检测Nkx2.5、GATA-4、Desmin和α-actin的基因表达.结果 ①第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.②诱导4 w后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因;与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Nkx2.5、GATA-4、Desmin 和α-actin mRNA的表达明显增强.结论 SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用,并且在Nkx2.5基因表达上SalB的优势更加明显.
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关 键 词: | 丹酚酸B 骨髓间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌样细胞 基因 |
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