大鼠髓样细胞表达激发受体-1／人IgG融合蛋白真核表达载体的构建表达与鉴定

目的 构建大鼠髓样细胞表达激发受体-1（TREM-1）/人IgG融合蛋白的真核表达载体，并在家蚕Bm细胞中实现稳定表达。方法 克隆大鼠TREM-1胞外段与人IgGFe段，片段连接后PCR扩增，再与病毒穿梭载体BAC1连接，基因克隆，构建重组质粒。利用杆状病毒表达系统（Bar-to-Bar）筛选重组杆状病毒，在Bm细胞中进行融合表达，并用Western blot法行蛋白鉴定。结果 重组质粒酶切测序正确，确认克隆载体构建成功。Western blot结果说明该蛋白样品可被抗大鼠TREM-1抗体特异性识别，证明该蛋白为TREM-1/IgG融合蛋白。结论 成功构建了大鼠TREM-1/IgG融合蛋白真核表达载体，并在Bm细胞中稳定表达。