| 椰子花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定 |
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| 引用本文： | 孟光,姚敏,刘志刚,邬玉兰,张红云.椰子花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定[J].中国免疫学杂志,2009,25(6). |
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| 作者姓名： | 孟光 姚敏 刘志刚 邬玉兰 张红云 |
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| 作者单位： | 1. 海口市人民医院,海口,570208
2. 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,518060 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省自然科学基金，广东省科技重点专项基金，深圳市科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆并表达椰子花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(Profilin).方法:利用RT-PCR结合RACE技术克隆椰子花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析.然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个椰子花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性.结果:克隆获得了椰子花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸.经分析,这个序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.61,分子量约为14 kD.此序列已被GeneBank收录,登陆号为EF173598.重组椰子花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达和纯化后,经Western blot检测具有良好的免疫学活性.结论:成功地克隆和表达了椰子花粉profilin,为该花粉profilin用于椰子花粉过敏诊断和免疫治疗提供了理论依据.
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| 关 键 词： | 椰子花粉 基因表达 纯化 鉴定 |
Cloning,expression and the immune characterization of panallergen profilin in coco(Cocos nucifera Linnaeus) |
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| MENG Guang,YAO Min,LIU Zhi-Gang,WU Yu-Lan,ZHANG Hong-Yun.Cloning,expression and the immune characterization of panallergen profilin in coco(Cocos nucifera Linnaeus)[J].Chinese Journal of Immunology,2009,25(6). |
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| Authors: | MENG Guang YAO Min LIU Zhi-Gang WU Yu-Lan ZHANG Hong-Yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | profilin |
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