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人转化铁受体基因的克隆和表达
引用本文:李立,刘启才,刘立志,欧陕兴,吕衍春,刘学文,崔春艳,吴沛宏.人转化铁受体基因的克隆和表达[J].中华放射学杂志,2007,41(5):535-538.
作者姓名:李立  刘启才  刘立志  欧陕兴  吕衍春  刘学文  崔春艳  吴沛宏
作者单位:1. 华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心影像介入中心,广州,510060
2. 广州医学院实验医学研究中心
3. 广州军区总医院放射科
基金项目:国家“863”计划重大项目:鼻咽癌的分子分型和个体化诊疗(20060102A4002);广州市科技计划资助项目(200623-D2041);高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20040558093);广东省自然科学基金资助项目(5000136).
摘    要:目的探讨人转化铁受体基因(hTfR)克隆和高效表达的方法及临床意义。方法用RT-PCR法从人胚肝、肺组织中克隆hTfR基因,构建重组表达质粒pcDNA3-hTfR和pEGFP-C1-hTfR,转染人胚肾上皮HEK293细胞。用Western印迹法检测pcDNA3-hTfR转染HEK293细胞后hTfR蛋白的表达情况;用荧光显微镜和共聚焦荧光显微镜观察重组pEGFP-C1-hTfR质粒转染HEK293细胞后hTfR蛋白的表达水平及亚细胞定位。结果经过DNA测序证实,克隆的hTfR基因为全长cDNA序列(2332bp)。Western印迹法检测到转染细胞能有效表达190×10^3的hTfR蛋白,荧光显微镜和共聚焦荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白(GFP)-hTfR融合蛋白主要定位于细胞膜。结论从人胚肝、肺组织中可以成功克隆hTfR基因,该基因转染HEK293细胞后可获得hTfR蛋白的高效表达。hTfR主要定位于细胞膜。

关 键 词:受体  细胞表面  基因表达  评价研究
修稿时间:2006-04-10

Clone and expression of human transferrin receptor gene: a marker gene for magnetic resonance imaging
LI Li,LIU Qi-cai,LIU Li-zhi,OU Shan-xing,L Yan-chun,LIU Xue-wen,CUI Chun-yan,WU Pei-hong.Clone and expression of human transferrin receptor gene: a marker gene for magnetic resonance imaging[J].Chinese Journal of Radiology,2007,41(5):535-538.
Authors:LI Li  LIU Qi-cai  LIU Li-zhi  OU Shan-xing  L Yan-chun  LIU Xue-wen  CUI Chun-yan  WU Pei-hong
Institution:State Key Laboratory of Oncology in Southern China, Imaging Diagnostic and Interventional Center, Cancer Center, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510060, China
Abstract:
Keywords:Receptors  cell surface  Gene expression  Evaluation studies
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