| 带免疫佐剂CEA基因疫苗的构建及其稳定同步表达的研究 |
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| 引用本文： | Huang AQ,Lai YD,Li XY,Gu JF,Tao S,Cai WB,Xie JW,Luo CQ. 带免疫佐剂CEA基因疫苗的构建及其稳定同步表达的研究[J]. 癌症, 2004, 23(3): 282-287 |
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| 作者姓名： | Huang AQ Lai YD Li XY Gu JF Tao S Cai WB Xie JW Luo CQ |
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| 作者单位： | 中山大学中山医学院生物化学教研室,广东,广州,510089;广州医学院化学致癌研究所,广东,广州,510050;中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅科技计划,广西科技攻关项目,N0.2002C30305,0235024-23,, |
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| 摘 要： | 背景与目的：基因疫苗是目前肿瘤免疫基因治疗研究的热点。目前癌胚抗原阳性肿瘤的治疗效果不佳,本研究拟利用质粒pVAX1构建带有免疫佐剂白细胞介素2同步表达的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)基因疫苗,探讨一种新的肿瘤生物治疗方法。方法：利用RT-PCR从患者肿瘤组织中钓取CEA目的基因cDNA;运用分子克隆技术,通过内部核糖体进入位点(IRES),将CEA cDNA和hIL-2 cDNA连接于质粒pVAX1中,采用化学发光免疫法和ELISA双抗体夹心法分别检测CEA抗原和hIL-2因子的表达;同时用蛋白质分析软件分析和预测目的抗原的特性。结果：测序结果证实本实验所构建的重组质粒插入DNA序列无错配,质粒上所接入的CEAcDNA与GenBank公布的M29540和M17303的序列99．8％同源,经蛋白质分析软件预测,其抗原性、跨膜结构片段、信号肽位点和二、三级结构特征与同源癌胚抗原基本一致。hIL-2 cDNA与母本序列100％同源。检测结果说明该重组质粒在体外CHO细胞株中可同步表达CEA和hIL-2分子。结论：从肿瘤组织中成功地获取了CEA cDNA,所构建的pVCEA2重组质粒能在体外细胞中同步表达CEA和IL-2蛋白分子,这为进一步体内实验研究基因治疗CEA阳性肿瘤提供了新的可能途径。
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| 关 键 词： | 癌胚抗原 基因疫苗 安全性质粒 内部核糖体进入位点 白细胞介素2 |
| 文章编号： | 1000-467X(2004)03-0282-06 |
| 修稿时间： | 2003-05-19 |
Construction of carcinoembryonic antigen (CEA) gene vaccine and stable coexpression with an immune adjuvant |
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| Huang Ai-Qiang,Lai Yan-Dong,Li Xiu-Ying,Gu Jin-Fa,Tao Sha,Cai Wei-Bin,Xie Jin-Wei,Luo Chao-Quan. Construction of carcinoembryonic antigen (CEA) gene vaccine and stable coexpression with an immune adjuvant[J]. Chinese journal of cancer, 2004, 23(3): 282-287 |
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| Authors: | Huang Ai-Qiang Lai Yan-Dong Li Xiu-Ying Gu Jin-Fa Tao Sha Cai Wei-Bin Xie Jin-Wei Luo Chao-Quan |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry, Zhongshan Medical College, Sun Yat-Sen University, Guangzhou, Guangdong, 510089, PR China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Carcinoembryonic antigen(CEA) Gene vaccine Safe kind plasmid Interna l ribosomal entry site (IRES) Interleukin 2 (IL-2) |
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