应用反相高效液相色谱内标法测定血清尿酸

目的 评价以5-氟尿嘧啶(5-FU)作内标的反相高效液相色谱(HPLC)测定血清尿酸(UA)的方法 ,拟初步推荐其作为血清UA测定的候选参考方法 ;并应用此方法 评价常规酶比色法测定血清UA的结果 偏倚.方法 对测定血清UA的反相HPLC内标法进行方法 学评价;通过测定有证参考物质(SRM)、参加国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)参考实验室考察活动,验证此方法 的准确性及可靠性.以反相HPLC内标法为比较方法 ,以6种常用检测系统中的酶比色法作为实验方法 ,对61份血清样本进行测定.组成6个比对组,对每组比对数据作散点图、偏倚图,计算线性方程和相关系数(R2),进行偏倚评估.结果 反相HPLC内标法测定UA线性范围达1 190 μmol/L,批内变异系数(CV)＜2.1%,日间CV＜3.9%,绝对回收率为96.2%～101.0%,平均相对回收率为95.1%～99.4%.测定SRM的平均相对偏倚为-8.29%;测定IFCC参考实验室考察活动提供的样本,其结果 与同位素稀释质谱(ID-MS)法的相对偏倚范围为-3.45%～-1.26%;在Beckman、Roche、Dade、Vitros封闭系统及Beckman、Roche开放系统中的酶比色法分别与反相HPLC内标法比较,各组中2种方法 均相关良好(R2=0.996 9、0.997 2、0.995 2、0.996 7、0.997 3、0.994 7),在UA为120、470L、630 μmol/L时,预期相对偏倚范围分别为-14.6%～4.3%、-0.4%～8.0%、0.8%～8.8%,其中Beckman封闭系统测定结果 与反相HPLC内标法的一致性好,Roche封闭系统低值偏低,Dade和Vitros封闭系统高值偏高,封闭系统比开放系统结果 略好.结论 拟推荐以5-FU为内标的反相HPLC法作为血清UA测定的候选参考方法 .酶比色法在不同检测系统中所测结果 存在一些差异.

Determination of uric acid in human serum using a revered-phase high perfermance liquid chromatography