复合因素构建大鼠肝硬化模型与益舒软肝丸的干预

目的:观察益舒软肝丸对肝硬化大鼠肝功能及肝组织形态学的影响。方法:实验于2004-10/2006-04在三峡大学中药药理国家二级实验室完成。①实验分组:80只大鼠随机分正常对照组8只,模型组72只。在造模过程中死亡30只,造模6周末随机取2只检测造模成功后,剩余40只大鼠随机分为模型对照组12只、益舒软肝丸0.4g/kg组10只、益舒软肝丸0.8g/kg组9只、益舒软肝丸1.6g/kg组9只。②实验方法:采用四氯化碳油剂、高脂低蛋白食物复合因素造肝硬化模型。模型对照组给予生理盐水(1mL/只)灌服,治疗组给予益舒软肝丸的混悬液灌胃,1次/d,连续灌胃12周。③实验评估:观察动物的饮食、活动、毛色、死亡等情况。于实验末称动物体质量及全肝、脾脏湿质量,计算脾指数和肝脏指数。取部分血清用自动生化分析仪检测肝功能相关指标。另取部分血清按放射免疫试剂盒方法检测血清透明质酸、层黏连蛋白和Ⅲ型前胶原水平。取肝左叶,制备切片分别用于苏木精-伊红染色和VG染色,观察组织学变化。结果:①大体观察结果:正常对照组大鼠无死亡,营养状况良好。模型对照组大鼠毛质粗糙,消瘦,精神萎靡,动作迟钝,易激惹,个别老鼠趾甲易出血,死亡4只;益舒软肝丸0.4g/kg组死亡3只,益舒软肝丸0.8g/kg组死亡2只,益舒软肝丸1.6g/kg组死亡2只。②体质量和肝脏、脾脏脏器系数:模型对照组大鼠体质量明显低于正常对照组(P<0.01),用药各组大鼠体质量明显回升(P<0.05);模型对照组肝脏、脾脏脏器系数高于正常对照组(P<0.01);用药各组肝脏、脾脏脏器系数低于模型对照组(P<0.01,P<0.05),益舒软肝丸0.8g/kg组与正常对照组最接近。③肝功能各项指标:用药各组血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平低于模型对照组,胆碱酯酶水平高于模型对照组(P<0.01,P<0.05)。用药各组血清透明质酸、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原水平低于模型对照组(P<0.05);其中益舒软肝丸0.8g/kg组降低血清透明质酸、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原水平作用最明显。用药各组羟脯氨酸含量也低于模型对照组(P<0.01,P<0.05)。④组织学变化:与模型对照组大鼠比,用药组组织切片显示汇管区有少量纤维组织增生,但未见假小叶结构。结论:采用复合因素造模法成功构建了大鼠肝硬化模型。益舒软肝丸有很好的逆转肝硬化的作用。

Effect of Yishuruanganwan on reversing cirrhosis in rats