| 组织因子途径抑制物2基因真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 汤志刚,孙振阳,胡何节,许戈良,陈炯,李建生. 组织因子途径抑制物2基因真核表达载体的构建及鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(45): 9112-9115 |
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| 作者姓名： | 汤志刚 孙振阳 胡何节 许戈良 陈炯 李建生 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学附属安徽省立医院普通外科,安徽省合肥市,230001 |
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| 摘 要： | 目的:构建人组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor2,TFPI-2)基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,并对其进行酶切鉴定。方法:实验于2006-09/12在安徽省立医院中心实验室完成。实验方法:①从人胎盘组织中提取总RNA,反转录合成cDNA,以特异性引物扩增TFPI-2基因全长mRNA。②扩增产物回收纯化后用限制性内切酶酶切,与经同样处理的载体pEGFP-C1进行连接反应,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α。③碱变性法提取质粒进行限制性内切酶酶切分析,并进行DNA序列测定。结果:①成功克隆了708bp的TFPI-2基因片段。②构建了人TFPI-2基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,经限制性内切酶酶切,电泳分析后得到了大小分别为708bp的目的基因片段和4.6kb的载体片段,测序结果与TFPI-2mRNA的cDNA序列吻合。结论:通过基因重组技术,构建了稳定表达TFPI-2的人TFPI-2的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2。
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| 关 键 词： | TFPI-2基因 绿色荧光蛋白质类 克隆,分子 |
| 文章编号： | 1673-8225（2007）45-09112-04 |
| 修稿时间： | 2007-05-07 |
Construction and identification of eukaryotic expression vector of tissue factor pathway inhibitor-2 gene |
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| Tang ZG,Sun ZY,Hu HJ,Xu GL,Chen J,Li JS. Construction and identification of eukaryotic expression vector of tissue factor pathway inhibitor-2 gene[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(45): 9112-9115 |
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| Authors: | Tang ZG Sun ZY Hu HJ Xu GL Chen J Li JS |
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| Affiliation: | Department of General Surgery, Anhui Provincial Hospital Affiliated to Anhui Medical University. Hefei 230001, Anhui Province, China |
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