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应用等位基因多重聚合酶链反应检测结核分枝杆菌katG基因315位点突变
引用本文:金嘉琳,张文宏,翁心华,陈澍,邵凌云. 应用等位基因多重聚合酶链反应检测结核分枝杆菌katG基因315位点突变[J]. 中华检验医学杂志, 2005, 28(8): 779-782
作者姓名:金嘉琳  张文宏  翁心华  陈澍  邵凌云
作者单位:200040,上海,复旦大学附属华山医院传染科
基金项目:国家“十五”科技攻关计划资助项目(2001BA705803)
摘    要:目的 建立等位基因特异性多重聚合酶链反应(MAS-PCR)方法,检测katG基因315位点的突变。方法 根据结核分枝杆菌的katG序列,分别设计出3条特异性寡聚核苷酸引物,采用MAS-PCR技术,检测katG基因315位点的突变以间接判断对异烟肼的耐药性。同时与常用的RFLP方法进行比较。结果 对临床分离异烟肼敏感株(30株)及异烟肼耐药株(54株)分别采用MAS-PCR和PCR.RFLP方法同时进行扩增,敏感株均未见有突变。MAS-PCR对耐药株的检出率为88.9%(48/54)。对于RFLP方法无法检出的S315N类型的突变亦能检出。结论 MAS-PCR方法有较高的敏感性及特异性,快速、经济、操作简便。

关 键 词:分支杆菌,结核 聚合酶链反应 异烟肼 点突变 聚合酶链反应检测 等位基因特异性 多重聚合酶链反应 katG基因 结核分枝杆菌 位点突变
收稿时间:2004-09-02
修稿时间:2004-09-02

New multiplex allele-specific PCR assay targeting katG codon 315 variation for detection of isoniazid- resistant Mycobacterium tuberculosis strains
JIN Jia-lin,ZHANG Wen-hong,WENG Xin-hua,CHEN Shu,SHAO Ling-yun. New multiplex allele-specific PCR assay targeting katG codon 315 variation for detection of isoniazid- resistant Mycobacterium tuberculosis strains[J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2005, 28(8): 779-782
Authors:JIN Jia-lin  ZHANG Wen-hong  WENG Xin-hua  CHEN Shu  SHAO Ling-yun
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis    Polymerase chain reaction    Isoniazid    Point mutation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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