| 全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞及其诱导分化 |
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| 引用本文： | 蔡鹏,朱绍兴,苏一鸣,黄世勇. 全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞及其诱导分化[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2009, 13(36). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.36.014 |
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| 作者姓名： | 蔡鹏 朱绍兴 苏一鸣 黄世勇 |
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| 作者单位： | 福建医科大学附属协和医院泌尿外科,福建省福州市,350001 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 背景:骨髓中的间充质干细胞含量极少,每1×104～1×105个单核细胞中约有1个骨髓间充质干细胞,需要在体外分离、纯化、扩增后才能满足体内移植要求.目的:观察体外分离培养的骨髓间充质干细胞生物学特性及多向分化潜能.设计、时间及地点;细胞学体外观察,于2007-10/2008-12在福建医科大学附属协和医院泌尿外科研究室完成.材料:清洁级雄性近交系SD大鼠30只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供.方法:通过全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,待细胞融合至80%～90%胰蛋白酶消化传代.取传至第3代细胞,分别向成骨、成脂方向诱导分化.主要观察指标:倒置相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测其表面标记,茜素红染色检测其成骨能力,油红O染色检测其成脂能力.结果:原代及传代的骨髓间充质干细胞均呈长梭形成纤维细胞样,连续传代10代以上,细胞始终保持旺盛的生长及扩增能力.第3代骨髓间充质干细胞CD90,CD44,CDl06均呈阳性表达,而CD34,CD45,CD11b呈阴性.成骨诱导21 d后,可见大量橘红色矿化结节形成.成脂诱导2周后,可见细胞的胞浆内出现大量红染脂滴. 结论:全骨髓贴壁培养法可大量分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞,所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能.
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| 关 键 词： | 间充质干细胞 骨髓 生物学特性 分化 |
Isolation, culture and multi-directional differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells by using the whole bone marrow adherence method |
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| Cai Peng,Zhu Shao-xing,Su Yi-ming,Huang Shi-yong. Isolation, culture and multi-directional differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells by using the whole bone marrow adherence method[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2009, 13(36). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.36.014 |
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| Authors: | Cai Peng Zhu Shao-xing Su Yi-ming Huang Shi-yong |
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