党参多糖调控NF-κB信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠T细胞免疫紊乱和气道炎症的影响

目的] 研究党参多糖通过调控核转录因子κB（NF-κB）信号通路对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠T细胞免疫紊乱和气道炎症的影响。方法] 从60只SD大鼠中随机挑出50只建立慢阻肺“肺脾气虚证”模型，余下10只作为对照组。通过烟熏加脂多糖法并配合番泻叶浸液建立大鼠慢阻肺脾肺气虚证模型。将建模成功的大鼠随机分为5组，地塞米松组给予1.95 mg/kg的地塞米松，党参多糖高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg/kg的党参多糖，模型组和对照组均按照大鼠体质量1 mL/kg灌胃生理盐水。每日1次，连续治疗30 d。流式细胞仪检测大鼠外周血中CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平；瑞氏-吉姆萨染色（Giemsa）后对肺组织灌洗液中炎性细胞计数；苏木素-伊红（HE）染色检测大鼠肺组织病变；实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测大鼠肺组织NF-κB、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）信使核糖核酸（mRNA）相对表达量；通过免疫共沉淀法检测肺组织中NF-κB和IκBα结合水平；通过凝胶迁移实验（EMSA）检测大鼠肺组织中NF-κB与DNA结合情况；通过蛋白免疫印记（WB）检测大鼠肺组织核NF-κB、胞浆NF-κB、IκBα蛋白表达水平及磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）水平。结果] 治疗后，地塞米松组和党参多糖高、中、低剂量组大鼠外周血CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均高于模型组（P<0.05）；模型组巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数量均高于对照组（P<0.05），地塞米松组和党参多糖高、中、低剂量组均低于模型组（P<0.05）；与对照组相比，模型组大鼠肺组织出现严重炎性细胞浸润，气管壁变形增厚，地塞米松组和党参多糖高、中、低剂量组均出现好转；免疫共沉淀结果显示，IκBα与NF-κB可结合，且模型组IκBα和NF-κB结合最少，党参多糖低剂量组稍多，地塞米松组和中剂量组较多，党参多糖高剂量组更多，对照组最多。IκBα mRNA、胞浆NF-κB蛋白和IκBα蛋白相对表达水平结果显示：模型组均低于对照组（P<0.05），地塞米松组和党参多糖高、中、低剂量组均高于模型组（P<0.05）。结论] 党参多糖可抑制慢阻肺肺脾气虚证大鼠T细胞免疫紊乱，减轻气道炎症反应和肺组织病变，推测可能与抑制NF-κB信号传导，下调NF-κB mRNA和核NF-κB蛋白表达水平，上调IκBα mRNA和蛋白表达水平，上调胞浆NF-κB蛋白表达水平，抑制NF-κB核位移，抑制p-IκBα有关。