硫化氢通过抑制ROS介导的内质网应激改善脓毒症心肌损伤的研究

  目的  探讨硫化氢（H₂S）对脓毒症心肌损伤中活性氧（ROS）介导的内质网应激的影响。  方法  采用盲肠结扎穿刺术（CLP）诱导SD大鼠脓毒症模型，将大鼠随机分成假手术（sham）组、脓毒症（CLP）组、脓毒症+硫氢化钠（NaHS）（CLP+NaHS）组。超声心动图观察各组大鼠左心室功能，检测大鼠血浆H₂S的水平；通过乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）水平检测以及ROS染色评估大鼠心肌氧化应激水平；HE染色观察大鼠心肌组织形态变化，透射电子显微镜观察心肌细胞线粒体超微结构；Western blot检测细胞内源性硫化氢合成酶半胱硫氨酸-γ-裂解酶（CSE）、3-巯基丙酮酸硫转移酶（3-MST）表达变化，内质网应激标志性蛋白:磷酸化（p）-激酶蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、p-细胞翻译启始因子2α（eIF2α）、p-肌醇需要酶1α（IRE1α）、活化转录因子（ATF）4和C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达变化；TUNEL染色观察大鼠心肌细胞凋亡变化。   结果  脓毒症大鼠左室射血分数（LVEF）、左心室缩短分数（LVFS）降低（P<0.05），血浆H₂S降低（P<0.05），血浆H₂S与LVEF和LVFS呈线性相关（r2=0.62、r2=0.64，P均<0.05）。脓毒症组大鼠ROS水平明显增强，LDH水平增高（P<0.05），MDA表达增强（P<0.05），GSH表达下降（P<0.05）；在HE染色中可见炎性细胞浸润，心肌细胞水肿，透射电子显微镜可观察到线粒体明显损伤，可见线粒体水肿，嵴结构溶解等情况；Western blot结果显示，CSE、3-MST表达水平有所下降（P<0.05），内质网应激标志性蛋白p-PERK、p-eIF2α、IRE1α、ATF4和CHOP蛋白表达水平升高（P<0.05）；TUNEL染色结果显示心肌细胞凋亡水平明显增加（P<0.05）。NaHS处理后，LVEF和LVFS升高（P<0.05），血浆H₂S升高（P<0.05）。心肌氧化应激水平降低，HE与透射电镜显示心肌形态学有改善，线粒体损伤减轻，CSE、3-MST水平升高（P<0.05），p-PERK、p-eIF2α、IRE1α、CHOP蛋白表达下降（P<0.05），心肌细胞凋亡水平有所下降（P<0.05）。  结论  H₂S通过抑制ROS介导的内质网应激，减少脓毒症心肌细胞凋亡，从而改善脓毒症心肌功能障碍。

Hydrogen Sulfide Ameliorates Myocardial Injury Caused by Sepsis Through Suppressing ROS-Mediated Endoplasmic Reticulum Stress