TRAF6通过内源性凋亡通路促进卡介苗诱导的巨噬细胞凋亡 |
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作者姓名: | 马沁梅 刘 莉 于嘉霖 宫照乾 王晓平 吴晓玲 邓光存 |
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作者单位: | 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏 银川 750021;宁夏大学生命科学学院,宁夏 银川 750021;宁夏回族自治区第四人民医院,宁夏 银川 750021 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32060160,32160162);;宁夏自然科学基金(2022AAC02009)~~; |
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摘 要: | 目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对卡介苗(BCG)诱导巨噬细胞凋亡的调控作用。方法 Q-PCR检测活动性结核患者外周血中TRAF6的表达后利用不同感染复数的BCG感染RAW264.7细胞,在感染的不同时间通过Q-PCR和Western blot检测巨噬细胞中Caspase 3和TRAF6的表达。时间梯度试验处理组分为5组:对照组(未感染,C)、BCG感染6 h组、12 h组、18 h组和24 h组;感染复数试验处理组分为5组:对照组(未感染,C)、5 MOI组、10 MOI组、15 MOI组和20 MOI组。随后,通过小干扰RNA技术敲减RAW264.7细胞中TRAF6的表达,并结合BCG感染建立TRAF6敲减模型。TRAF6敲减实验分为4组:阴性对照组(NC)、BCG单独感染组(BCG)、TRAF6小干扰RNA单独处理组(siRNA)和TRAF6小干扰RNA与BCG共处理组(siRNA+BCG)。利用平板涂布法检测巨噬细胞菌载量变化。通过流式细胞术检测巨噬细胞凋亡率和线粒体膜电位变化。利用Western blot检测TRAF6、Caspase 3、PARP、Bcl-...
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关 键 词: | TRAF6 卡介苗 巨噬细胞 细胞凋亡 内源性细胞凋亡 |
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