腺苷抑制GSK-3β活性对大鼠急危重症胰腺炎肠屏障功能障碍的影响

目的研究腺苷对大鼠急危重症胰腺炎(SAP)肠屏障功能障碍(IBD)的保护途径。方法将64只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组8只、SAP组40只(分为0、3、6、12、24 h不同时间点处理组，每组8只)、腺苷处理组(Ade-Ⅳ组)8只、线粒体膜通透性转移孔(mPTP)抑制剂环孢素A(CsA)组8只。大鼠SAP造模完成后，血清胰淀粉酶升高及镜下胰腺组织病理学改变提示造模成功，HE染色观察大鼠小肠组织损伤情况，Western blotting法检测大鼠小肠组织P-GSK-3β表达水平，应用电镜观察小肠线粒体超微结构的变化，采用差速离心法分离线粒体，并在Ca2+诱导下完成线粒体肿胀实验。结果大鼠SAP造模成功后，SAP组40只大鼠血清胰腺淀粉酶水平随着0~12 h时间点的延长逐渐升高，且12 h达到高峰，24 h下降至最低点，差异均有统计学意义(P < 0.01)；切片染色观察，SAP组小肠黏膜充血、水肿，并伴有柱状上皮细胞坏死，甚至出现部分绒毛的断裂、缺损，而Ade-Ⅳ组肠黏膜上皮及绒毛形态基本完整，绒毛排列基本整齐；P-GSK-3β的表达，Ade-Ⅳ组较SAP组显著增加(P < 0.01)；小肠线粒体超微结构在SAP组肿胀明显，还出现了空泡变性，而Ade-Ⅳ组肿胀程度减轻，空泡变性减少；线粒体肿胀实验发现520 nm处线粒体吸光度值CsA组 < Ade-Ⅳ组 < SAP组，差异有统计学意义(P < 0.01)。结论腺苷对SAP并发的IBD有保护作用，其机制可能与抑制GSK-3β活性，进而阻止mPTP的开放有关。