口腔黏膜上皮细胞的培养条件

目的：研究不同培养条件下口腔黏膜上皮细胞的生长情况，了解不同添加成分对上皮细胞生长和分化的影响，从而探索一条简便有效的培养口腔黏膜上皮细胞的方法。方法：选取健康成年人拔除第三磨牙时切除的牙龈黏膜，在超净台内用眼科剪、镊尽可能去除上皮下结缔组织，滴加Dispase，4℃冷消化16～18h，取上皮皮片用眼科剪剪成约1mm^3大小，随机分成12组，分别接种于25mm培养瓶中，每瓶加入培养液1ml(MCDB153)，放入37℃，体积分数为5％CO2细胞培养箱中培养。12组培养液中分别加入不同浓度的胎牛血清、表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、霍乱毒素和转铁蛋白，观察细胞生长情况。选取能够正常增殖的细胞进行传代培养，并于传代后的第2d、4d、6d、8d、10d、12d、14d纪录细胞总数。结果：低血清加入各种生长因子的培养液中上皮细胞生长良好，光镜下观察为典型的“铺路石”状，传代后经免疫组化证实是上皮细胞，而高血清培养液中由于成纤维细胞的生长导致无法传代。结论：MCDB153培养液中加入胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子和霍乱毒素所构成的培养液，是一种有效的口腔黏膜上皮细胞培养液。

Conditions of culturing human oral mucosa epithelial cell