| H9N2亚型禽流感病毒ns1基因克隆 |
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| 引用本文： | 林东子,张志珍,梁念慈.H9N2亚型禽流感病毒ns1基因克隆[J].广东医学,2006,27(12):1791-1792. |
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| 作者姓名： | 林东子 张志珍 梁念慈 |
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| 作者单位： | 广东医学院生物化学与分子生物学教研室,广东,湛江,524023 |
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| 基金项目： | 广东医学院校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的克隆A／Duck／Shantou／2088／01（H9N2）亚型禽流感病毒ns1基因，构建重组融合表达载体。方法采用常规PCR方法扩增ns1基因cDNA，将扩增产物克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-3中，构建重组质粒pGEX-4T-3／ns1，转化BL21（DE3）宿主菌；采用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切和序列分析鉴定插入的ns1，基因；并用IPTG诱导工程菌，SDS—PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达。结果双酶切鉴定表明，ns1基因已正确克隆到GST融合表达载体中，测序结果证实ns1基因序列与目的基因序列完全一致。SDS—PAGE电泳显示，融合蛋白在BL21（DE3）工程菌中以可溶形式表达，重组融合蛋白GST—NS1的表达量占菌体总蛋白的20％左右。经Western blotting分析证实，重组融合蛋白可以被GST特异性抗体所识别。结论本实验成功克隆了H9N2亚型禽流感病毒ns1基因，构建了融合表达载体，并进行了融合蛋白的诱导表达，为进一步研究NS1蛋白在流感流行中的作用打下基础。
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| 关 键 词： | H9N2亚型禽流感病毒 ns1基因 克隆 融合蛋白 |
| 收稿时间： | 2006-06-06 |
| 修稿时间： | 2006年6月6日 |
Cloning of ns1 gene of H9N2 Avian influenza virus |
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| LIN Dong-zi,ZHANG Zhi-zhen,LIANG Nian-ci.Cloning of ns1 gene of H9N2 Avian influenza virus[J].Guangdong Medical Journal,2006,27(12):1791-1792. |
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| Authors: | LIN Dong-zi ZHANG Zhi-zhen LIANG Nian-ci |
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