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小干扰RNA抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43的表达
引用本文:曹正国,诸禹平,孙友文,董晓程,亓林,肖峻,陈昊,任维华,邹练.小干扰RNA抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43的表达[J].中华男科学杂志,2007,13(5):440-443.
作者姓名:曹正国  诸禹平  孙友文  董晓程  亓林  肖峻  陈昊  任维华  邹练
作者单位:1. 安徽医科大学附属省立医院,泌尿外科,安徽,合肥,230001
2. 安徽医科大学附属省立医院,中心实验室,安徽,合肥,230001
3. 中国人民解放军第二炮兵总医院泌尿外科,北京,100088
摘    要:目的:利用小干扰RNA(siRNA)抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43(Cx43)的表达和检测细胞间间隙连接通讯功能,探讨该技术在阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接和阴茎勃起功能研究中的应用。方法:利用Ambion公司设计软件,构建靶向人Cx43基因的siRNA重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Cx43基因和蛋白的相对表达水平、划痕标记荧光染料传输技术检测细胞间间隙通讯功能,并分别与siRNA阴性对照、空白对照组比较。结果:酶切和测序证实siRNA真核表达载体构建成功。siRNA重组质粒转染细胞后的Cx43 mRNA和蛋白相对表达水平分别为(0.45±0.08)%、(0.56±0.06)%,与siRNA阴性对照组(0.72±0.04)%、(0.80±0.08)%和空白对照组(0.74±0.09)%、(0.77±0.11)%相比,差异均有显著性(P(0.05);转染后的细胞间间隙连接通讯功能也显著降低。结论:siRNA能有效抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞Cx43的表达和阻断间隙连接介导的间隙连接通讯功能。

关 键 词:阴茎海绵体  平滑肌细胞  间隙连接  连接蛋白  细胞间通讯  
文章编号:1009-3591(2007)05-0440-04
收稿时间:2006-07-14
修稿时间:2006-07-142007-01-15

Small Interfering RNA Inhibits the Expression of Connexin43 in the Human Corpus Cavernosum Penis Smooth Muscle Cells
CAO Zheng-guo,ZHU Yu-ping,SUN You-wen,DONG Xiao-cheng,QI Lin,XIAO Jun,CHEN Hao,REN Wei-hua,ZOU Lian.Small Interfering RNA Inhibits the Expression of Connexin43 in the Human Corpus Cavernosum Penis Smooth Muscle Cells[J].National Journal of Andrology,2007,13(5):440-443.
Authors:CAO Zheng-guo  ZHU Yu-ping  SUN You-wen  DONG Xiao-cheng  QI Lin  XIAO Jun  CHEN Hao  REN Wei-hua  ZOU Lian
Abstract:
Keywords:corpus cavernosum penis  smooth muscle cell  gap junction  connexin  intercellular communication  human
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