类叶牡丹提取物对TNF-α诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞因子的影响

目的利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)对细胞因子分泌的影响来探讨类叶牡丹提取物(Caulophyllum robustum Maxim Extract,CRME)抗类风湿性关节炎(RA)的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测CRME对MH7A细胞活力的影响,选取半数抑制浓度(IC_(50))以下的药物浓度作为干预剂量;ELISA法检测CRME(50,100,500μg·mL~(-1))剂量对TNF-α(20 ng·mL~(-1))诱导MH7A细胞释放白介素-6(IL-6)、白介素-4(IL-4)、血管内皮生长因子(VEGF)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、促凋亡因子Bax、Fas L和抗凋亡因子Bcl-2的影响。结果 CRME在质量浓度为50μg·mL~(-1)~500μg·mL~(-1)对细胞活力均无影响,IC_(50)值为645.32μg·mL~(-1)。与空白组比较,模型组细胞上清中IL-4、IL-6、VEGF、RANKL、Bax、Bcl-2和Fas L含量均显著提高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,CRME各剂量组均能降低IL-6水平及升高IL-4水平(P0.01);CRME 100,500μg·mL~(-1)剂量组能明显降低VEGF的表达(P0.05),且具有浓度依赖性;CRME 500μg·mL~(-1)剂量组能明显降低RANKL含量(P0.01);CRME 100μg·mL~(-1)剂量组可促进Fas L的表达(P0.01);CRME 50μg·mL~(-1)剂量组可降低Bcl-2的表达(P0.05);CRME各剂量组均可促进Bax的表达(P0.01)。结论减轻炎症、降低血管翳形成、增加骨保护,促进异常增生的滑膜细胞的凋亡可能是CRME抗类风湿性疾病的机理之一。