软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析 |
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引用本文: | 雷子贤,戚华兵,苏楠,赵子瑜,陈锚锚,何启芬,赵玲,金旻,谢杨丽,李福兵,杜晓兰,陈林.软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析[J].中国骨质疏松杂志,2009,15(1):9-15. |
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作者姓名: | 雷子贤 戚华兵 苏楠 赵子瑜 陈锚锚 何启芬 赵玲 金旻 谢杨丽 李福兵 杜晓兰 陈林 |
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作者单位: | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战刨伤中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划(973计划),国家自然科学基金杰出青年科学基金,国家自然科学基金重点项目 |
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摘 要: | 目的 获得在软骨细胞中条件性敲除PIEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠并进行初步表型分析.方法 通过FTEN条件性基因敲除小鼠(Ptenflox/flox小鼠),与软骨细胞特异表达Cre重组酶的小鼠(Col2aCre)交配,获得在软骨细胞中特异敲除PTEN基因小鼠(Col2aCre:Ptenfolox/flox);同时,利用Ptenflox/flox小鼠与FGFR3增强型点突变小鼠(Fgfr3G369C/+小鼠,即ACH小鼠)交配,子代杂合子小鼠(Ptenflax/:ACH)之间再交配,获得Ptenflox/flox:ACH小鼠;通过Col2aCre:Ptenflox/flox和Ptenflox/flox:ACH交配即可获得在软骨细胞中特异性敲除PTEN基因的FGFB3增强型点突变小鼠((Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH).采用PCR对小鼠基冈型进行鉴定,免疫荧光染色检测PTEN基因的敲除效率,通过X光平片摄影对小鼠的表型进行初步分析.结果 获得了在软骨细胞中敲除PTEN的FGFR3点突变小鼠,免疫荧光染色证实Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠软骨细胞中PTEN蛋白因为基因敲除而表达很低.初步的表型分析显示:Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠身长、尾长均较Pten flox/flox:ACH小鼠长(P<0.05,n=5).Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠表型,较Ptenflox/flox:ACH小鼠的侏儒表型有所缓解.结论 采用基于Cre/LoxP系统的条件性基因敲除策略,获得了在软骨细胞中敲除PTEN基因的FGFR3增强型突变小鼠,表型分析初步显示,软骨细胞特异性敲除PTEN基因可部分缓解由FGFR3增强型点突变所导致的小鼠侏儒表型.该小鼠的获得,为研究P13K/AKT信号通路在FGFR3突变介导的软骨生长抑制中的作用提供了实验动物平台.
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关 键 词: | 软骨发育不全 条件性基因敲除 小鼠 |
Initial phenotype analysis on chondrocyte PTEN conditional knockout mice generation from FGFR3 gain of function mutant |
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Abstract: | |
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Keywords: | PTEN FGFR3 |
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