| 在肝母细胞瘤中筛选XTP6的反式调节基因及其意义 |
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| 引用本文： | 张雷,马清涌,孟宪魁,李康,成军.在肝母细胞瘤中筛选XTP6的反式调节基因及其意义[J].现代肿瘤医学,2009,17(2). |
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| 作者姓名： | 张雷 马清涌 孟宪魁 李康 成军 |
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| 作者单位： | 1. 西安交通大学第一医院,陕西,西安,710061
2. 北京地坛医院传染病研究所,北京,100011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的: 应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建XTP6反式激活相关基因差异表达的cDNA文库,筛选XTP6蛋白反式激活相关基因.方法: 构建XTP6真核表达载体pcDNA3.1(-)-XTP6,并将其转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;48h后收获细胞后提取mRNA并逆转录成cDNA,tester cDNA经RsaI酶切消化后分成两组,分别与两种不同接头衔接,再与过量的driver cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR反应,第二次PCR产物与pGEM-Teasy克降载体连接,构建cDNA消减文库,转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆经PCR鉴定后进行测序及同源性分析.结果: 成功构建人XTP6蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA文库.扩增后得到70个200-1000bp插入片段的克隆,随机挑选其中20个插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得11种已知功能编码基因.结论: 筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞周期调节、生物代谢和炎症修复密切相关的蛋白编码基因.
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 抑制性消减杂交 |
Cloneing and screening transregulated genes of XTP6 by SSH |
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| ZHANG Lei,MA Qing-yong,MENG Xian-kui,LI Kang,CHENG Jun.Cloneing and screening transregulated genes of XTP6 by SSH[J].Journal of Modern Oncology,2009,17(2). |
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| Authors: | ZHANG Lei MA Qing-yong MENG Xian-kui LI Kang CHENG Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | XTP6 |
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