| 重组人胱抑素C在大肠杆菌中的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 张骥,张巍,赵卫国.重组人胱抑素C在大肠杆菌中的表达及纯化[J].国际检验医学杂志,2007,28(5):393-394. |
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| 作者姓名： | 张骥 张巍 赵卫国 |
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| 作者单位： | 1. 200060,上海市普陀区人民医院检验科
2. 200023,上海市科委医学检验重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的研究构建人胱抑素C(Cys C)的重组表达质粒及其在大肠杆菌中的表达和纯化。方法采用反转录-聚合酶链反应从人肝组织中获取Cys C cDNA,并将其插入到pET-28a(+)质粒中,重组质粒pET-28a-CysC转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达可溶性CysC。重组CysC采用Ni2+-NTA系统进行层析纯化。结果核酸序列测定与预期一致,CysC表达水平达到146mg/L,约占菌体总可溶性蛋白的13.5%,表达产物用SDS-PAGE鉴定,其相对分子质量为13.3×103,经纯化后蛋白纯度达90%。结论成功构建Cys C原核表达系统和蛋白纯化,为制备抗体以及研制Cys C免疫纳米微球测定试剂奠定了基础。
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| 关 键 词： | 西司他汀类 质粒 大肠杆菌 基因表达 |
Expression and purification of recombinant human cystatin C in Escherichia coli |
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| ZHANG Ji,ZHANG Wei,ZHAO Wei-guo.Expression and purification of recombinant human cystatin C in Escherichia coli[J].International Journal of Laboratory Medicine,2007,28(5):393-394. |
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| Authors: | ZHANG Ji ZHANG Wei ZHAO Wei-guo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cystatins Plasmids Escherichia coli Gene expression |
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