人α型地酸受体基因融合表达载体的构建和表达

目的 采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）法获得人α型叶酸受体（folate receptor alpha,FOLR-1,FR-1)基因序列，构建融合表达载体pGEXFR-1并进行表达。方法 将RT－PCR法扩增的FOLR－1基因，克隆入融合表达载体pGEX-4T-2中，使其受控于Ptac启动子，转化大肠杆菌DH5α。经异丙基－β－D－硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，用SDS－PAGE检测表达产物。结果 SDS－PAGE显示，FOLR－1表达产物的相对分子质量（Mr）约为55000，与预期的结果相符。Western-blot证实，D相应Mr处，有GST－FR1融合蛋白的显示条带。结论 成功地构建了FOLR－1基因的融合表达载体并获得表达，为进一步探讨卵巢癌的免疫治疗提供了实验依据。