| 山奈酚通过mTORC1信号促进牵张力下小鼠骨髓间充质细胞成骨分化机制研究 |
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| 作者姓名： | 崔琳娜 蒋校文 黄华庆 陈金勇 |
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| 作者单位： | 郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;湖南省自然科学基金;郴州市第一人民医院重点项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨山奈酚(kaempferol,Kae)对周期性单轴牵张力下小鼠骨髓间充质细胞(bone marrow mes?enchymal cells,BMMCs)成骨分化过程中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin com?plex 1,mTORC1)信号通路的作用。方法对体外分离培养的小鼠BMMCs施加形变量10%的单轴动态牵张力,通过细胞毒性试验筛选出合适浓度Kae,并添加工具药pp242改变内源性mTOR信号,在牵张后4 h利用化学比色法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性变化、ELISA法检测骨钙素(osteocalcin,OCN)表达量,流式细胞仪检测细胞内钙离子相对含量;利用Western Blot检测内源性mTORC1信号通路主要分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(ribosomal proteinS6 kinases,S6K)、4E/BP1的磷酸化表达及成骨转录因子Runx2和Osterix的表达变化,qRT?PCR检测上述因子mRNA表达水平。结果10μmol/L Kae对细胞的抑制作用较小,且成骨能力最强。加力结束后4 h,Kae能够有效促进BMMCs成骨分化,ALP表达为(153.04±18.72)U/mg,OCN表达为(1.64±0.25)U,成骨转录因子Runx2、Osterix的mRNA水平和蛋白水平表达上调,细胞内钙离子含量下降,同时mTORC1信号通路中mTOR、S6K mRNA水平及蛋白磷酸化表达上调,4E/BP1 mRNA水平及蛋白磷酸化表达下调;在加入pp242抑制mTORC1信号表达后,mTOR、S6K mRNA水平及蛋白磷酸化表达下调,4E/BP1 mRNA水平及蛋白磷酸化表达上调,BMMCs成骨分化效应显著被抑制,Runx2、Osterix的mRNA水平和蛋白表达显著下调,ALP及OCN表达下调,细胞内钙离子含量增高。结论Kae通过mTORC1信号通路促进牵张力下小鼠BMMCs成骨分化。
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| 关 键 词： | 骨髓间充质细胞 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 单轴牵张力 牵张成骨 碱性磷酸酶 骨钙素 Runt相关转录因子 核糖体蛋白S6激酶 山奈酚 |
Kaempferol promotes osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal cells under tension stress via the mTORC1 signaling pathway |
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| Authors: | CUI Linna JIANG Xiaowen HUANG Huaqing CHEN Jinyong |
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| Institution: | (Department of Stomatology,The First People′s Hospital of Chenzhou City,Institute of Translation Medicine,University of China South,Chenzhou 423000,China;School of Stomatology of Southern Medical University,Guangzhou 510515,China) |
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| Abstract: | |
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