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改良原代大鼠肝细胞的体外分离培养和功能研究
引用本文:庄鹏,李志莹,范紫香,江元森,姚集鲁.改良原代大鼠肝细胞的体外分离培养和功能研究[J].热带医学杂志,2008,8(10).
作者姓名:庄鹏  李志莹  范紫香  江元森  姚集鲁
作者单位:1. 深圳市第四人民医院感染科,深圳,518033
2. 深圳市第六人民医院呼吸内科,深圳,518052
3. 中山大学附属第三医院感染科,广州,510630
摘    要:目的建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统。方法采用0.02%胶原酶和Percoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析安定代谢能力。结果分离纯化的大鼠肝细胞总数(2~3)×108cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常。培养3d后ALT、AST显著下降,加入NH4Cl后8d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3~4天达到高峰,培养的2~5d内肝细胞可有效清除安定。结论通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力。

关 键 词:肝细胞  细胞培养  分离  细胞功能

Research on the Function and Morphometrics of Cultured Primary Rat Hepatocytes
ZHUANG Peng,LI Zhi-ying,FAN Zi-xiang,JIANG Yuan-sen,YAO Ji-lu.Research on the Function and Morphometrics of Cultured Primary Rat Hepatocytes[J].Journal Of Tropical Medicine,2008,8(10).
Authors:ZHUANG Peng  LI Zhi-ying  FAN Zi-xiang  JIANG Yuan-sen  YAO Ji-lu
Abstract:
Keywords:
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