| 人脂联素基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李丙蓉,邓华聪,兰丽珍,郑宏庭,刘金波. 人脂联素基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达[J]. 中华内分泌代谢杂志, 2006, 22(5): 464-466 |
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| 作者姓名： | 李丙蓉 邓华聪 兰丽珍 郑宏庭 刘金波 |
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| 作者单位： | 400016,重庆医科大学附属第一医院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30370670,30070356） |
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| 摘 要： | 目的构建人脂联素（APM1）基因真核表达载体，并检测其在HEK293细胞中的表达水平。方法用PCR法从测序正确的pGEM-T-APM1质粒上，扩增出两端带有Sfi Ⅰ酶切位点的人脂联素基因，再将扩增出的片段亚克隆到T载体上，用sfi Ⅰ酶切T载体和pCDEF空载体，将酶切后的片段进行连接、转化、筛选、鉴定、测序。将成功构建的pCDEF—APM1质粒转染HEK293细胞，ELISA检测培养上清中脂联素的水平。结果构建的pCDEF-APM1质粒能有效转染HEK293细胞，并在培养上清中检测到较高水平的脂联素蛋白。结论成功地构建了人脂联素基因的真核表达载体，并在HEK293细胞中获得高效表达。
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| 关 键 词： | 脂联素 克隆 分子 基因表达 真核细胞 |
| 收稿时间： | 2005-05-17 |
| 修稿时间： | 2005-05-17 |
Construction of eukaryotic expression plasmid of APM1 gene and its expression in HEK 293 cells |
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| LI Bing-rong,DENG Hua-cong,LAN Li-zhen,ZHENG Hong-ting,LIU Jin-bo. Construction of eukaryotic expression plasmid of APM1 gene and its expression in HEK 293 cells[J]. Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism, 2006, 22(5): 464-466 |
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| Authors: | LI Bing-rong DENG Hua-cong LAN Li-zhen ZHENG Hong-ting LIU Jin-bo |
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| Affiliation: | Department of Endocrinology, First Hospital Affiliated to Chongqing University of Medical Science, Chongqing 400016 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adiponectin Cloning, molecular Gene expression Eukaryotic cells |
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