| 人血管内皮细胞生长因子腺病毒表达系统的构建及体外表达 |
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| 作者姓名： | Cai S Ma Q Yu X Dang G Ma D |
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| 作者单位： | 1. 北京大学第三医院骨科
2. 北京大学人类疾病治疗中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (3 0 170 947) |
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| 摘 要： | 目的 构建人VEGF12 1腺病毒表达载体 ,探讨应用血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因治疗骨科缺血性疾患的可行性。 方法 采用分子克隆技术 ,从pCDI/VEGF12 1质粒获得hVEGF12 1cDNA ,经穿梭质粒pShuttle克隆到腺病毒质粒上 ,构成Adeno VEGF12 1腺病毒重组质粒 ,经酶切及测序鉴定正确后 ,包装成为重组Adeno VEGF12 1腺病毒 ,并进行电镜观察及滴度测定。用病毒感染小鼠骨髓基质细胞 ,用逆转录PCR方法检测VEGF12 1基因在骨髓基质细胞中的转录 ,用免疫印迹及免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达。 结果 经酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒构建成功 ,电镜显示包装细胞中有病毒存在 ,包装的病毒滴度为 8× 10 10 pfu/ml,RT PCR证实有VEGF12 1mRNA的转录 ,免疫印迹及免疫组化检测有VEGF12 1蛋白的表达 ,而对照未见VEGF12 1转录和表达。 结论 构建的VEGF12 1腺病毒表达载体可在体外表达 ,VEGF基因治疗有可能用于骨科缺血性疾患
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 腺病毒 基因疗法 骨髓基质细胞 缺血性骨疾病 |
| 修稿时间： | 2001年10月12 |
Construction of adenoviral vector encoding human VEGF(121) cDNA and its expression in vitro |
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| Cai S,Ma Q,Yu X,Dang G,Ma D.Construction of adenoviral vector encoding human VEGF(121) cDNA and its expression in vitro[J].Chinese Journal of Surgery,2002,40(5):379-382. |
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| Authors: | Cai Shanbao Ma Qingjun Yu Xijie Dang Gengting Ma Dalong |
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| Institution: | Department of Orthopidics, Third Hospital, Peking University, Beijing 100083, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Endothelial growth factors Blood vessels Adenoviruses human Gene therapy Marrow stromal cell |
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