登革Ⅱ型病毒SYBR GreenⅠqRT-PCR方法的建立 |
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引用本文: | 胡哲,吴腾飞,关振宏,陈启军.登革Ⅱ型病毒SYBR GreenⅠqRT-PCR方法的建立[J].中国病原生物学杂志,2010(2). |
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作者姓名: | 胡哲 吴腾飞 关振宏 陈启军 |
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作者单位: | 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室;吉林大学畜牧兽医学院;中国医学科学院病原生物学研究所寄生虫学研究室; |
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摘 要: | 目的建立敏感、特异、快速的检测登革Ⅱ型病毒(DENV-2)SYBR GreenⅠqRT-PCR方法。方法根据GenBank上发表的DENV-2株核苷酸序列,应用Primer Express 3.0软件在保守区设计特异性引物,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,利用Sanger测序验证该方法的特异性和敏感性。结果该方法与其他血清型登革病毒、流感病毒等均无交叉反应,最低检出20个病毒拷贝/μl RNA。检测14份已知阳性和阴性血清,结果与预期一致。结论本研究建立的DENV-2 SYBR GreenⅠqRT-PCR特异性强、敏感性高,可用于输入性DENV-2早期感染诊断。
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关 键 词: | 登革Ⅱ型病毒 SYBRGreenⅠqRT-PCR 建立 |
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