| 人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 靳雁斌,李英丽,石丽萍,颜光涛. 人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定[J]. 标记免疫分析与临床, 2001, 8(2): 84-89 |
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| 作者姓名： | 靳雁斌 李英丽 石丽萍 颜光涛 |
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| 作者单位： | 解放军总医院基础所生化室 |
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| 摘 要： | 为了获得有免疫原性的人脂皮素－1（lipocortin-1,LC-1)蛋白，以便疫动物获得抗体，建立了免疫分析方法，而且更深入地探讨LC－1抗炎机制及其在临床上的应用。采用基因工程的方法进行重组人LC－1的原核表达并鉴定，主要结果如下：（1）从U937细胞中提取总RNA，以此为模板行反转录PCR，成功地扩增了1038bp的人LC－1cNDA基因，并将此基因全长克隆入pUC18载体，经测序分析证实克隆序列与文献报道的序列基本一致。（2）成功地构建了原核表达质粒pBV220/LC-1并在大肠杆菌中实现表达，经SDS－PAGE电泳和Western免疫印迹分析，证实重组菌产生37kD的表达产物，且此蛋白可与LC－1抗体特异结合，实现了人LC－1基因的克隆及原抗表达，获得了有免疫学活性的LC－1，为LC－1的基础研究和临床应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 脂皮素－1 反转录聚合酶链反应 克隆 原核表达 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹分析 |
| 文章编号： | 1006-1703(2001)02-0084-05 |
| 修稿时间： | 2000-10-05 |
The Expression and Determination of Human Lipocortin-1 Protein |
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| JIN Yan-bin,LI Ying-li,SHI Li-ping,et al.. The Expression and Determination of Human Lipocortin-1 Protein[J]. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine, 2001, 8(2): 84-89 |
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| Authors: | JIN Yan-bin LI Ying-li SHI Li-ping et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lipocortin-1 RT-PCR Clone Prokaryotic expression SDS-PAGE Western blotting assay |
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