| 摘 要： | 目的:探讨呼吸道合胞病毒诱导的树突细胞自噬对哮喘小鼠气道反应性的影响及五虎汤的干预作用。方法:160只SPF级雌性BALB/c小鼠,用呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)复合鸡卵蛋白(Ovalbumin,OVA)雾化吸入激发哮喘,造模成功后随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松1.8 mg/kg组、雷帕霉素1 mg/kg组及五虎汤6.4 g/kg、3.2 g/kg、1.6 g/kg组,并予以相应药物干预两周。使用动物呼吸机检测小鼠气道反应性值;HE染色法观察小鼠肺组织病理学改变;Masson和PAS染色法观察气道胶原沉积和粘液储备情况;Western Blot法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(microtubule-asso ciated protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ),程序性死亡受体-1(programmed cell death-1,Beclin-1)、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 I型(microtubule-asso ciated protein 1 light chain 3 I,LC3-I)蛋白水平;透射电镜检查肺组织自噬小体。结果:与正常对照组比较,模型对照组气道反应性显著增高(P0.01),支气管管腔狭窄,血管及支气管周围大量炎性细胞浸润,气道黏液储备指数和气道胶原沉积指数明显增高(P0.01),小鼠肺组织中α-SMA、TGF-β、LC3-Ⅱ/LC3-I、Beclin-1蛋白相对表达均显著升高(P0.01),DC自噬小体数量增加(P0.05);与模型对照组比较,五虎汤6.4 g/kg、3.2 g/kg、1.6 g/kg组及雷帕霉素1 mg/kg组小鼠气道反应性明显下降(P0.01),气道胶原沉积情况显著下降(P0.01),肺组织中α-SMA和TGF-β蛋白表达均显著下调(P0.01),五虎汤6.4 g/kg、3.2 g/kg剂量组及雷帕霉素1 mg/kg组肺组织树突细胞中自噬小体数量明显增多(P0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达显著增高(P0.01)。结论:RSV感染可以应激性引起肺组织树突细胞自噬水平的上调,而树突细胞自噬水平的上调有利于促进机体的抗病毒反应,降低哮喘小鼠气道反应性;五虎汤对此的改善作用可能与其上调哮喘小鼠肺组织中树突细胞自噬水平有关。
|
