调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究 |
| |
引用本文: | 许多荣,罗绍凯,苏畅,方荸荠,黄珊,李娟.调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究[J].中山医科大学学报,2009,30(1). |
| |
作者姓名: | 许多荣 罗绍凯 苏畅 方荸荠 黄珊 李娟 |
| |
作者单位: | 中山大学附属第一医院血液科,广东广州510080 |
| |
摘 要: | 【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体,每一个突变体在RANK膜内部分含60bp缺失。再将RANK-cDNA第1561~1680bp之间的120bp片段分为10个片段,构建10个新的TNFR1/RANK突变体,每一个突变体在其RANK膜内部分含12bp缺失。用包装细胞PlatE分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过感染分别将这些逆转录病毒转染到肿瘤坏死因子受体1和2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNFɑ刺激后、观察哪一个突变体不能诱导OC形成。【结果】首先发现表达TNFR1/RANK^1561-1620或TNFR1/RANK^1621-1680的逆转录病毒感染的BMM不能分化成OC,然后在RANK-cDNA第1561~1680bp这个大的片段中又发现表达TNFR1/RANK^1597-1608、TNFR1/RANK^1609-1620、TNFR1/RANK1621-1632或TNFR1/RANK^1633-1644的逆转录病毒感染的BMM也不能分化成OC。【结论】RANK-cDNA第1597~1644bp之间的48bp片段(5′-gggcaggtgatgaacttcaagggtgacatcatcgtggtgtatgtcagc-3′)对OC形成起决定性作用。
|
关 键 词: | RANK特异性cDNA片段 嵌合体 破骨细胞 分化 |
本文献已被 维普 等数据库收录! |
|