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水蛭素在毕赤酵母中的分泌表达
引用本文:龙铟,刘家云,刘莉,王宗仁.水蛭素在毕赤酵母中的分泌表达[J].第四军医大学学报,2006,27(8):673-676.
作者姓名:龙铟  刘家云  刘莉  王宗仁
作者单位:第四军医大学,西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学,西京医院检验科,陕西,西安,710033;第四军医大学,药学系药理学教研室,陕西,西安,710033
摘    要:目的:构建水蛭素毕赤酵母表达载体,获得重组蛋白在毕赤酵母中的分泌型表达. 方法: 通过PCR扩增获得水蛭素HV2, HV2-N47K基因,将序列正确的基因序列插入酵母表达载体pPIC9α分泌信号下游,再亚克隆入高拷贝载体pPIC9K,构建表达质粒pPIC9K-HV2, pPIC9K-HV2-N47K. 重组质粒转化宿主菌GSM1168,G418抗性筛选高拷贝的稳定表达菌株,经甲醇诱导表达并对表达产物进行鉴定. 结果: 成功构建了水蛭素毕赤酵母表达载体,获得水蛭素在毕赤酵母中的分泌型表达,表达产物具有抗凝血酶活性. 结论: 水蛭素在毕赤酵母中获得分泌型表达,为研究新药奠定了基础.

关 键 词:水蛭素  毕赤酵母  分泌表达
文章编号:1000-2790(2006)08-0673-04
收稿时间:2006-01-10
修稿时间:2006-01-20

Secretory expression of hirudins in Pichia pastoris
LONG Yin,LIU Jia-Yun,LIU Li,WANG Zong-Ren.Secretory expression of hirudins in Pichia pastoris[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2006,27(8):673-676.
Authors:LONG Yin  LIU Jia-Yun  LIU Li  WANG Zong-Ren
Abstract:
Keywords:hirudin  Pichia  secretory expression
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