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| 一种快速鉴定重组酵母克隆的方法 | |
| 作者姓名： | 蔡欣 段聚宝 邹民吉 王嘉玺 |
| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
| 摘 要： | 甲基营养型毕赤酵母巴斯德毕赤酵母(Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ)是目前较为有效的外源基因表达系统,可实现目的蛋白的高效分泌表达,且可对目的蛋白进行糖基化加工等[1]。毕赤酵母表达系统利用的是乙醇氧化酶基因(Ａｏｘ1)启动子作为强诱导型启动子,可被甲醇诱导。宿主菌ＧＳ115在Ｈｉｓ4基因位点被突变,因而只有当携有外源基因和Ｈｉｓ4基因的表达载体(如ｐＰＩＣ9或ｐＨＩＬＳ1)与酵母染色体在Ａｏｘ1基因处发生同源重组后,酵母克隆才能在组氨酸缺陷培养基(ＭＤ)平板上生长。而此时由于酵母基因组上Ａｏｘ1基因被取代,重组克隆仅能利用… |
| 关 键 词： | 重组酵母 克隆 快速鉴定 聚合酶链反应 |
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