| 重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 徐丽慧,洪岸,何贤辉,汪炬.重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备[J].免疫学杂志,2005,21(3):186-189. |
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| 作者姓名： | 徐丽慧 洪岸 何贤辉 汪炬 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学生物工程研究所,广州 510632;暨南大学广东省生物工程药物重点实验室,广州 510632;暨南大学教育部基因组药物工程研究中心,广州 510632
2. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广州 510632 |
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| 基金项目： | 国家“十五”重大专项基金(2002AA2Z3344)，广东省“十五”重大专项基金(2001A1090208)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原，制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子，构建hbFGF’原核表达载体并在大肠杆菌(E．coli)中表达，以纯化的hbFGF、免疫新西兰兔，制备高效价抗血清，用于重组hbFGF、的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在E．coli中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95％以上的重组hbFGF，以该重组蛋白免疫兔子，在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1：512000。免疫印迹分析显示该抗血清与E．coli中表达的重组hbFGF、和标准hbFGF、均有特异性反应，但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应，经E．coli菌体蛋白吸附的抗血清，与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清，经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。
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| 关 键 词： | 碱性成纤维生长因子 可溶性表达 抗血清 交叉反应性 |
| 文章编号： | 1000-8861(2005)03-0186-04 |
| 修稿时间： | 2004年9月6日 |
Prokaryotic expression of recombinant human bFGF and production of high titer anti-serum against bFGF |
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| XU Li-hui,HONG An,HE Xian-hui,WANG Ju.Prokaryotic expression of recombinant human bFGF and production of high titer anti-serum against bFGF[J].Immunological Journal,2005,21(3):186-189. |
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| Authors: | XU Li-hui HONG An HE Xian-hui WANG Ju |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Basic fibroblast growth factor Soluble expression Antiserum Cross-reactivity |
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