RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用 |
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引用本文: | 李华,王欣璐,杨扬,张剑,汪根树,姜楠,陈规划.RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用[J].南方医科大学学报,2008,28(8):1323-1326. |
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作者姓名: | 李华 王欣璐 杨扬 张剑 汪根树 姜楠 陈规划 |
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作者单位: | 1. 中山大学附属第三医院肝脏移植中心,广东,广州,510630 2. 广州军区广州总医院核医学科,广东,广州,510010 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划),国家自然科学基金,广东省自然科学基金,广东省医学科学技术研究基金 |
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摘 要: | 目的 利用RNAi技术降低人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,研究其对人肝癌细胞的增殖和凋亡影响.方法 构建针对hTERT基因的siRNA真核表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT,制备靶向hTERT的重组逆转录病毒;用重组逆转录病毒感染HepG2人肝癌细胞,以TRAP法检测端粒酶活性变化;流式细胞仅检测细胞凋亡率;MTT法检测肿瘤细胞生长抑制情况.结果 成功制备出hTERT siRNA逆转录病毒表达载体;重组病毒感染HepG2细胞24、48、72 h后端粒酶活性分别下降了23.84%、58.03%和85.01%(P<0.05);感染后24 h细胞凋亡率29.05%;MTT实验结果显示肿瘤生长受到抑制,并存在一定量效和时效关系.结论 hTERT siRNA能特异性使hTERT基因表达抑制,端粒酶活性下降,肝癌细胞增殖受到抑制.
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关 键 词: | RNA干扰 人端粒酶逆转录酶 基因治疗 细胞凋亡 |
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