| 切割bcr/abl核酶的逆转录病毒载体构建及其对K562细胞的影响 |
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| 引用本文： | 吴勇,陈元仲,胡建达.切割bcr/abl核酶的逆转录病毒载体构建及其对K562细胞的影响[J].中华血液学杂志,1998,19(12):623-626. |
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| 作者姓名： | 吴勇 陈元仲 胡建达 |
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| 作者单位： | 福建省血液病研究所，福建医科大学附属协和医院 |
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| 摘 要： | 目的：研究ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中的作用以及探索ＣＭＬ基因治疗的可能性。方法：合成针对ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因转录本ｂ３ａ２断裂点“锤头状”核酶的ｃＤＮＡ序列，定向克隆于逆转录病毒载体内，通过脂质体介导的ＤＮＡ转染法，将核酶基因导入Ｋ５６２细胞，并通过克隆分析法、流式细胞术（ＦＣＭ）、逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）、ＤＮＡ电泳及电镜观察等方法检测核酶对Ｋ５６２细胞的影响。结果：①核酶转染Ｋ５６２细胞后４８小时克隆形成抑制率达８５％；②细胞内Ｐ２１０蛋白合成受到明显抑制；③ＲＴＰＣＲ半定量检测ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ表达水平明显下降；④核酶处理组Ｋ５６２细胞发生凋亡，表现为：在ＦＣＭ图谱上可见明显的凋亡峰；ＤＮＡ电泳分析出现典型的梯状ＤＮＡ带；电镜观察呈现凋亡早期形态学改变。结论：核酶基因通过逆转录病毒载体导入Ｋ５６２细胞后可成功表达，使Ｋ５６２细胞ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ及Ｐ２１０蛋白表达水平下降，抑制Ｋ５６２细胞增殖，同时诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡。
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| 关 键 词： | 核酶 融合基因.bcr／abl 白血病.K562 |
Construction of retrovirus vector of bcr/abl mRNA cleaving ribozyme gene and its effects on K562 cells |
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| Wu Yong,Chen Yuanzhong,Hu Jianda,et al..Construction of retrovirus vector of bcr/abl mRNA cleaving ribozyme gene and its effects on K562 cells[J].Chinese Journal of Hematology,1998,19(12):623-626. |
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| Authors: | Wu Yong Chen Yuanzhong Hu Jianda |
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| Institution: | Fujian Institute of Hematology, Union Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350001. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ribozyme Fusion gene bcr/abl Leukemia K562 |
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