| 小鼠CXCR4基因的克隆和慢病毒介导的表达 |
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| 引用本文： | 王莉,胡轶阳,王耀春,韩骅.小鼠CXCR4基因的克隆和慢病毒介导的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(7). |
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| 作者姓名： | 王莉 胡轶阳 王耀春 韩骅 |
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| 作者单位： | 第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的:克隆小鼠CXCR4基因并建立其慢病毒表达系统.方法:设计合成PCR引物, 从小鼠骨髓有核细胞来源的cDNA中扩增并克隆小鼠CXCR4基因的编码区.构建CXCR4-IRES-GFP表达单元后通过转染细胞, 观察GFP的表达证实其表达效能.然后建立慢病毒表达载体, 包装慢病毒后感染培养的细胞, 用流式细胞术分析其在被感染的细胞中的表达.结果:成功扩增了小鼠CXCR4基因的编码区.克隆入质粒载体后经DNA序列测定证实了其序列.通过转染细胞和流式细胞术以及荧光显微镜观察证实了CXCR4-IRES-GFP的表达效能.成功构建了CXCR4慢病毒表达载体, 感染细胞后经流式细胞术分析, 证实被感染的细胞可以表达小鼠CXCR4.结论:成功扩增、克隆了小鼠CXCR4基因, 并成功建立起其慢病毒表达系统, 为后续的基础和应用研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 基因 表达 慢病毒 |
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