| 摘 要： | 目的:通过一次性不同时间的急性运动,探讨小鼠骨骼肌中核因子E2相关因子2(Nrf2)与抗氧化反应元件(ARE)结合活性随运动时间的变化。方法:将C57BL/6J野生小鼠,根据运动时间随机分为三组,分别是安静对照组(0h组)、1小时运动组(1h组)和6小时运动组(6h组);采取坡度为5%,速度为20m/min的跑台运动,运动结束后3小时取两侧骨骼肌。酶联免疫法(ELISA)测定骨骼肌细胞核中的Nrf2-ARE结合活性,Western Blot法测定骨骼肌核蛋白中Nrf2含量,实时荧光定量PCR测超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、谷胱甘肽还原酶(GR)、γ谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCLm)、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx1)和血红素加氧酶(HO-1)等基因的m RNA表达水平。结果:(1)Nrf2的结合活性1 h组与0 h组相比基本无变化,6 h组与0 h组相比显著性增加(P<0.05);(2)核蛋白Nrf2的相对含量1 h组与0 h组相比基本无变化,6 h组与0 h组相比有增加的趋势但无显著性;(3)随着运动时间的增加,小鼠骨骼肌中GCLm、SOD1、SOD2、HO-1 m RNA相对表达量逐渐增高;Gpx1 m RNA相对表达量有增加的趋势但是无显著性;GR m RNA相对表达量无明显变化;与安静对照组相比,6 h组GCLm(P<0.01)、SOD1(P<0.01)、SOD2(P<0.05)、HO-1(P<0.01)m RNA相对表达量非常显著性或显著性增加。结论:(1)骨骼肌核蛋白Nrf2-ARE结合活性与运动时间呈正相关;(2)一次6小时长时间急性运动促进骨骼肌中Nrf2蛋白的核转位,显著增加核蛋白Nrf2-ARE的结合活性以及抗氧化酶GCLm、SOD1、SOD2、HO-1、Gpx1基因的m RNA水平。
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