| 人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 刘家云,龙铟,马越云,丁振若,于文彬,苏明权,郝晓柯.人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2007,23(5):416-419. |
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| 作者姓名： | 刘家云 龙铟 马越云 丁振若 于文彬 苏明权 郝晓柯 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院,临床分子生物学研究中心,陕西,西安,710032
2. 第四军医大学西京医院,中医科,陕西,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染CHO细胞并筛选阳性克隆,免疫荧光法鉴定重组BPI的表达和免疫学活性。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,与文献报道的序列相比,有6个核苷酸差异。转染筛选的阳性CHO细胞克隆表达产物能够被抗BPI的单克隆抗体所识别。结论BPI活性片段表达载体的构建及真核表达成功,为BPI功能的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 杀菌/通透性增强蛋白 逆转录PCR 真核表达 |
| 文章编号： | 1007-8738（2007）05-0416-04 |
| 修稿时间： | 2007-01-31 |
Construction of the eukaryotic expression vector of bioactive fragment of human bactericidal/permeability-increasing protein and its expression in CHO cells |
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| LIU Jia-yun,LONG Yin,MA Yue-yun,DING Zhen-ruo,YU Wen-bin,SU Ming-quan,HAO Xiao-ke.Construction of the eukaryotic expression vector of bioactive fragment of human bactericidal/permeability-increasing protein and its expression in CHO cells[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2007,23(5):416-419. |
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| Authors: | LIU Jia-yun LONG Yin MA Yue-yun DING Zhen-ruo YU Wen-bin SU Ming-quan HAO Xiao-ke |
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| Institution: | Research Center for Clinical Molecular Biology, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China. jiayun@fmmu.edu.cn |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bactericidal/permeability-increasing protein RT-PCR eukaryotic expression |
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