| 以鲁斯可皂苷元为配基的亲和层析柱的制备及其在纯化抗体中的应用 |
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| 引用本文： | 梁明,刘楠,刘吉华,余伯阳. 以鲁斯可皂苷元为配基的亲和层析柱的制备及其在纯化抗体中的应用[J]. 中国天然药物, 2006, 4(5): 363-367 |
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| 作者姓名： | 梁明 刘楠 刘吉华 余伯阳 |
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| 作者单位： | 中国药科大学中药复方研究室,南京,210038 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);江苏省自然科学基金;江苏省研究生培养创新工程项目 |
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| 摘 要： | 目的:以鲁斯可皂苷元(ruscogenin,RUS)为配基制备亲和层析柱,并应用于免疫亲和纯化抗血清。方法:将鲁斯可皂苷元衍生为带有两个-COOH臂的丁二酸单酯衍生物(succinylatedruscogenin,RUS-2HS),与带有10碳原子链的琼脂糖凝胶EAHSepharose4B偶联,制成亲和层析柱;以制备的亲和层析柱纯化人工合成抗原RUS-2HS-BSA(牛血清白蛋白)免疫家兔产生的抗血清,得到特异性较高的抗体,并检测纯化抗体的纯度及特异性。结果:成功将RUS-2HS作为配体偶联至亲和介质上,偶联量为4.24mg.mL-1,偶联率为53.25%;竞争性抑制试验显示纯化抗体交叉反应率下降,特异性提高;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示单一蛋白质条带,其相对分子质量约为51.2kD。结论:建立了以小分子天然活性产物为配基制备亲和柱的方法,应用于抗血清的纯化,获得的特异性抗体为探索该类难检测的活性成分的药理作用机制提供新的技术手段。
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| 关 键 词： | 鲁斯可皂苷元 亲和层析 抗体纯化 |
| 文章编号： | 1672-3651（2006）05-0363-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-02 |
| 修稿时间： | 2005-12-02 |
Preparation of Ruscogenin Affinity Chromatography Column and Its Application in the Purification of Antiserum |
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| LIANG Ming,LIU Nan,LIU Ji-Hua,YU Bo-Yang. Preparation of Ruscogenin Affinity Chromatography Column and Its Application in the Purification of Antiserum[J]. Chinese JOurnal of Natural Medicines, 2006, 4(5): 363-367 |
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| Authors: | LIANG Ming LIU Nan LIU Ji-Hua YU Bo-Yang |
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| Keywords: | Ruseogenin Affinity chromatography Antiserum purification |
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