食管癌Mal基因5′调控区的克隆及序列分析

目的：探讨Mal基因在人食管癌中表达下调的机制。方法Mal基因5′调控区是一高G＋C含量的区域,总G＋C含量占67．08％（487／726个）,经优于PCR反应条件扩增正常胎盘组织和人食管癌细胞系EC9706、EC8712、EC109的Mal基因5′端调控区,对PCR产物进行克隆和序列测定,对测序结果进行相比比较,结果：成功地扩增出Mal基因5′调控区。与正常胎盘组织相比,食管癌细胞系EC9706,EC8712、EC109均有Mal基因5′调控区第654位的T→C改变,相应的密友子TCC变为CCC,所编码的氨基酸由丝氨酸变为脯氨酸;EC9706还有第657位的T→C改变,相应的密码子TGC变为CGC,所编码的氨基酸由半胱氨酸变为精氨酸;EC8712有第139位的A→G改变,相应的密码子GGA变为GGG,所编码的甘氨酸仍为甘氨酸。结论：建立了Mal基因5′调控区的PCR扩增方法;食管癌Mal基因5′调控区可能存在点突变。