| 增强型绿色荧光蛋白基因转染及TGFβ3诱导前软骨干细胞向成软骨方向分化 |
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| 引用本文： | 游洪波,陈安民. 增强型绿色荧光蛋白基因转染及TGFβ3诱导前软骨干细胞向成软骨方向分化[J]. 中华小儿外科杂志, 2004, 25(6) |
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| 作者姓名： | 游洪波 陈安民 |
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| 作者单位： | 武汉,430030,华中科技大学同济医学院同济医院骨科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 994) |
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| 摘 要： | 目的 探讨增强型绿色荧光蛋白基因 (EGFP)转染前软骨干细胞 (PSCs)的效果及TGFβ3 诱导PSCs向成软骨方向定向分化的可行性。方法 利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(FGFR 3)表面标志的PSCs。采用脂质体介导法将EGFP基因转染PSCs,G4 18筛选得到EGFP基因修饰PSCs。用免疫组化及免疫荧光检测EGFP基因修饰PSCs的FGFR 3表达。采用藻酸盐凝胶培养 ,以TGFβ3 诱导分离纯化的PSCs向成软骨方向定向分化。应用免疫组化、RT PCR检测PSCs向成软骨方向分化过程中特异性软骨基质成分的表达情况。结果 EGFP基因转染PSCs后 ,2 4hGFP开始表达 ,4 8～ 72hGFP表达最强。G4 18筛选后 ,EGFP基因修饰PSCs体外培养 6周仍有较强GFP表达。在含TGFβ3 的藻酸盐凝胶培养 7、14、2 1d均有II型胶原表达 ;诱导2 1d的PSCs免疫组化检测可见细胞及周围均有X型胶原、Aggrecan、COMP表达 ;RT PCR检测显示在培养早期 ( 8d内 )开始出现Aggrecan、X型胶原、COMP等的表达 ,中期 ( 8d后...
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| 关 键 词： | 干细胞 荧光抗体技术 软骨形成 |
Transfection of precartilaginous stem cells with enhanced green fluorescence protein gene and transforming growth factor β3 inducing chondrogenesis in precartilaginous stem cells |
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| YOU Hong-bo,CHEN An-min. Transfection of precartilaginous stem cells with enhanced green fluorescence protein gene and transforming growth factor β3 inducing chondrogenesis in precartilaginous stem cells[J]. Chinese Journal of Pediatric Surgery, 2004, 25(6) |
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| Authors: | YOU Hong-bo CHEN An-min |
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| Affiliation: | YOU Hong-bo,CHEN An-min. Department of Orthopedics,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Stem cell Gene Fluorescent antibody technique Chondrogenesis |
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