转化生长因子β1信号通路对胚胎肝前体细胞分化的诱导作用

目的探讨TGFβ1对胚胎肝前体细胞(HPC)分化的影响。方法体外培养HPC-E14. 5细胞株并以细胞免疫荧光染色法鉴定。将细胞分为对照组(HPC)、HPC+TGFβ1组和HPC+SB431542组。HPC+TGFβ1组滴加外源性TGFβ1,HPC+SB431542组加入TGFβ1受体抑制剂SB431542,处理72 h后通过qRT-PCR法和Western Blot法分别检测AFP、Alb、细胞角蛋白19(CK19)mRNA及蛋白的表达情况;糖原染色法检测细胞分化后的功能。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Dunnett's t检验。结果 qRT-PCR检测结果:对照组的AFP mRNA表达量高于其他两组(F=128. 937,P 0. 01),HPC+TGFβ1组的CK19 mRNA表达量高于其他两组(F=414. 467,P 0. 01),HPC+SB431542组的Alb mRNA表达量最高(F=794. 929,P 0. 01)。Western Blot法检测结果:对照组的AFP蛋白表达量高于其他两组(F=269. 000,P 0. 01),HPC+TGFβ1组的CK19蛋白表达量高于其他两组(F=93. 010,P 0. 01),HPC+SB431542组的Alb蛋白表达水平均较其他两组明显升高(F=1086. 000,P 0. 01)。糖原染色法结果:对照组的糖原染色表达阳性面积比例小于其他两组(F=79. 251,P 0. 05)。结论 TGFβ1信号诱导HPC向有功能的胆管细胞分化,而阻断TGFβ1信号通路后HPC具有向成熟肝细胞分化的趋势,分化后的胆管细胞和肝细胞具有正常的糖原储存和合成功能,这些细胞可能能够参与代谢活动。