RNA干扰抑制血管平滑肌细胞MT1-MMP基因表达的实验研究 |
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引用本文: | 郭家龙,张凯伦,蒋雄刚,孙图成,蔡杰,陈军.RNA干扰抑制血管平滑肌细胞MT1-MMP基因表达的实验研究[J].华中科技大学学报(医学版),2009,38(5). |
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作者姓名: | 郭家龙 张凯伦 蒋雄刚 孙图成 蔡杰 陈军 |
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作者单位: | 1. 郑州大学第一附属医院胸外科,郑州,450052 2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,武汉,430022 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的 探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)shRNA真核表达载体(pGenesil-1-MT1-MMP)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)MT1-MMP基因mRNA表达及蛋白表达的影响.方法 构建质粒表达载体pGenesil-1-MT1-MMP和pGenesil-1-HK;实验分为3组:空白对照组,阴性对照组(加入pGenesil-1-HK),RNA干扰(RNAi)组(加入pGenesil-1-MT1-MMP).用脂质体瞬时转染VSMC,48 h后通过荧光显微镜观察转染效果,流式细胞仪检测转染效率.于转染后72 h采用RT-PCR方法检测MT1-MMP mRNA表达水平,用Western blot方法检测MT1-MMP蛋白质表达水平.结果 瞬时转染VSMC 48 h后通过流式细胞仪检测转染效率高达85.5%,转染pGenesil-1-MT1-MMP质粒72 h后,RNAi组MT1-MMP mRNA及蛋白质水平明显下调(P<0.05).结论 靶向MT1-MMP的短发夹RNA质粒能够高效地转染入VSMC,并能有效下调MT1-MMP基因mRNA和蛋白的表达.
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关 键 词: | 血管平滑肌细胞 RNA干扰 膜型基质金属蛋白酶-1 基因表达 |
Inhibitory Effects of RNA Interference on the Expression of MT1-MMP Gene of Vascular Smooth Muscle Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | vascular smooth muscle cell RNA interference membrane-typel matrixmetalloproteinase gene expression |
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